小鼠灌胃技术实验具体操作步骤
小鼠灌胃方法比较简单,需要关注的只有两点:一是要保持小鼠的头部和颈部成一直线,方便灌胃针头进入,二是动作要轻柔,从口角进入,防止损失食道。做的多了自然就熟练了。
经验总结
1. 在操作过程中最重要的是小鼠的固定。把小鼠放在笼子上,右手捏住它的尾巴,它会扒住笼子伸长身体,然后左手拇指和食指捏住它颈部皮肤(不用太用劲,保证它不能回头就行),其余三指抓住背部,就可以把它固定住了。注意头一定要固定好,头和躯体要保持一条直线,并且灌胃时使小鼠成竖直位,头向上。
2. 我们用的灌胃剂量是0.2 ml/10 g。开始时试过0.1 ml/10 g,灌完后小鼠立即俯卧喘息,大概是撑着了,后改用0.2 ml/10 g,灌完后小鼠没有明显不适。
3. 把握要领,动作尽量迅速,减少小鼠的不适感。
4. 小鼠灌胃剂量:0.1 ml/10 g体重,也就是说,一只20 g的小鼠,一般一次灌胃0.2 ml。
5. 灌胃的方法与技巧对了,一般不会有问题。
比如说抓小鼠的姿势(小鼠的身体最好伸展在一条直线上,不能让它乱动,要固定);还有,一定要用灌胃针灌胃(灌胃针的针尖部分是弯曲的);另外就是技巧上的问题了,进针时要从小鼠的嘴角进去,进去后让灌胃针顺着小鼠的上腭压着它的舌头进入食道,这当中会有种突破感,突破感过后就畅通无阻了,液体灌进去一点阻力也没有,若有阻力的话,那就说明你灌错地方了,取出灌胃针再来过,多练几次就熟练了,这还是很好练的。祝你好运!另外,灌胃的动作不能太粗鲁,一定要轻柔!
6. 20 g 的小鼠灌胃一天一次,只要操作得当不会被灌死。灌胃针可用12#注射器针头,磨平尖端,点焊为钝圆形.也有卖的灌胃针。
7. 操作前将灌胃针安在注射器上大致测量一下从口腔到胃内的位置(最后一根肋骨后缘)的长度,根据此距离确定插入深度,成年小鼠插入大约3厘米。成年小鼠每次最大可灌1.0毫升。
8. 最重要的是手法,感觉和熟练程度。固定好小鼠,身体最好伸展在一条直线,太松会动,太紧就把小鼠脖子勒住了。一般沿口角进针,抵达咽部会有抵触感,小鼠会有吞咽动作,此时阻力丧失,就可继续下行了。
刚开始几天难,往后就容易了,人熟练了,小鼠也习惯了。