科普：病理科的宝藏—蜡块
病理柳叶刀在2017年4月16日发表一期内容中我们讲过，患者手术或者穿刺取下来的病变组织（老百姓讲的“肉”）都会送到病理科进行处理，最后组织被包裹在石蜡中，以蜡块的形式进行保存。后续的病理诊断以及相应检测都需要借助这些蜡块来进行。因此，蜡块是病理诊断的重要材料保证，它是病理科的宝贝，不能随意被借出。如必须借出，使用完后也必须要归还。
那如果借不出蜡块，我又需要去其他医院做检测、做会诊，该怎么办呢？这个时候就需要我们从原医院拿取一些东西。这也就出现了文章开头的那些问题。
首先我们就来说说，医生让带的这些东西到底是什么？
白片：是指未经染色的石蜡组织切片。使用切片机从蜡块上切下来薄薄的一张蜡膜（通常是4µm），在水中展平，然后贴在一个玻璃片（载玻片）上，就做成了石蜡组织切片（图1），即我们平时所说的白片。白片上带有手术或者穿刺取下来的组织。
图1：石蜡切片的制作过程
蜡卷：使用切片机把蜡膜切下来直接装在EP管中（图2），这些无需贴在玻璃片上且呈卷状的蜡膜即是蜡卷。蜡卷上同样带有手术或者穿刺取下来的组织。
图2：蜡卷的制作过程
什么时候需要白片？什么时候需要蜡卷呢？分别需要多少？
病理诊断中一般需要借助三种手段：HE染色，免疫组化染色，分子检测。HE切片是诊断的基础，免疫组化染色是常规辅助手段，分子检测则是进一步的辅助手段。
HE染色和免疫组化染色都是在白片上直接进行的，而分子检测则根据项目的不同来提供相应材料。通常，如果进行FISH检测，则需要4µm的白片，白片的数量通常是所做探针的数量+2，即如果所做探针是3个，就准备5张切片。如果进行荧光定量PCR或测序，则需要7-10µm的蜡卷。蜡卷的数量取决于组织的大小。一般来讲，肿瘤面积大于4cm2,则需要5-8个卷，如肿瘤面积1-4cm2,则需要10-15个卷。当得不到蜡卷或病变组织需要做微切割时，也可将白片上的病变组织刮下来，再进行后续的操作。
总之，要做什么检测，需要多少标本量，都应事先咨询检测医生，以便提供足够的合适样本。当您拿着白片或蜡卷进行分子检测时，需要带上相应的HE切片，以便评估所提供样本是否满足检测的需要。
我要做会诊，都需要提供什么呢？
一般会诊要求提供：1.原病理报告单；2.HE切片及免疫组化染色片；3.白片10张或蜡块。如果不能提供HE和免疫组化切片，请准备15张白片。各种材料的长相如下图3。
图3.各种检测材料实物图
医院问我切哪个块，这是什么意思？
一个肿瘤患者手术切下来的组织可能很大，除病变（肿瘤）组织外，还可能有切缘、淋巴结等组织，因此就可能会有多个蜡块。那么到底该选哪个呢？答案是选肿瘤组织多、坏死及间质少的蜡块来进行后续的检测。通常，每一个蜡块都会有一个对应的HE切片，病理医生会根据HE切片来判断相应蜡块中病变组织的情况并进行选择。
医院问切多厚的白片？需不需要胶片？还问要不要烤片？
FISH检测要求白片的厚度一般是4µm，过薄、过厚都会影响检测结果的判断。荧光定量PCR、测序等项目，由于都需要把组织从玻璃片（载玻片）上分离下来提取核酸，所以对厚度并没有严格的要求，一般7µm~10µm即可。当然，白片的厚度会影响组织的量，如果切片较薄，就需要增加白片的数量。
使用胶片并烤片都是防止实验过程中贴在载玻片上的组织脱落的手段，因此，那些直接在切片上操作的项目，如FISH，需要提供胶白片或带正电荷的防脱载玻片制成的白片。烤片是FISH实验操作人员先要进行的一个步骤，所以患者提供的白片有没有烤过不会对检测有什么影响。对于荧光定量PCR、测序等项目，普通白片即可，不需要胶片或防脱片。
以上说了那么多，再结合之前的科普文章，相信大家可以理解会诊或进一步做分子检测时所需材料了吧？总之，要想得出准确的病理诊断，蜡块是重要的材料保证，HE切片是重要的材料基础，适当数量的白片和蜡卷也是少不了的。当然，在不确定分子检测项目之前，提供白片好于蜡卷，提供胶片好于普通白片，提供4µm切片好于过厚切片。