miRNA、miRNA mimics和miRNA inhibitor
microRNA(miRNA)是真核细胞生物中一类内源性的具有调控功能的非编码RNA,长度约为22bp。miRNA首先在细胞核内转录出较长的初级miRNA(primary miRNA 。pri-miRNA),然后在在核内有Drosha加工成60-70bp的发夹状RNA,即前体miRNA(miRNA percuser,pre-miRNA),在Exprotin-5复合物的帮助下被转运出细胞核,在胞质中被Dicer剪切成为成熟miRNA,随即被整合进RNA沉默复合物(RISC)中,与mRNA完全或不完全配对结合来调节基因表达。
miRNA mimics是化学合成的成熟miRNA模拟物。miRNA agomir是经过特殊化学修饰的miRNA激动剂,转染至细胞后模拟内源性miRNA发挥作用。miRNA mimics进一步增强內源miRNA的调控作用,降低细胞内蛋白表达量,进行功能获得行(gain-of-function)研究。实验表明miRNA mimics在细胞和动物实验水平,都可发挥miRNA作用。
miRNA inhibitor是化学修饰的miRNA抑制物,通过特异的靶向抑制某个miRNA分子,可以削弱內源miRNA的金银沉默效应,提高蛋白的表达量,进行功能缺失行(loss-of-function)研究,可以用来筛选miRNA靶位点,筛选调控某一基因表达的miRNA,筛选影响细胞发育过程的miRNA。
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