记一次失败的活体荧光成像
实验目的
评价药物在荷瘤小鼠体内的分布和肿瘤靶向效果。
实验材料
药物:标记荧光分子FITC
动物:皮下接种MDA-MB-231肿瘤细胞的裸鼠,接种2周后肿瘤黄豆大小,在裸鼠身体上用Marker笔标记上编号,备用
实验准备
尾静脉注射标记好的药物,带上注射过的裸鼠到仪器室成像。
实验结果
那么问题出在哪?(敲黑板!)
这里列举三个常见而重要的问题:
1.FITC(异硫氰酸荧光素)常用于体外实验的荧光标记,发射波长为520~530nm,用于体内实验会让荧光信号淹没在自发荧光的海洋里。(泥牛入海)
2.Marker笔划在裸鼠身体上会让标记的形状非常明显的成像出来,而且不容易擦掉。(一失足成千古恨)
3.没有提到空白对照和阳性对照,我们建议你带上空白对照小鼠和标记好的药物。(没有对比就没有‘伤害’)
活体荧光成像荧光分子该如何选?
(敲黑板!)
1.能用波长较长的就不用波长较短的
2.尽量避开500-600nm自发荧光的高峰
3.重点观察腹部信号的还要避开饲料的荧光高峰(约600-700nm)
以上为经验性的总结,有关活体荧光成像的具体问题可以联系我们!
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