非整合型慢病毒的类型包装病毒有哪些

整合酶缺陷型慢病毒(Integrase-deficient lentivirus,简称IDLV),也称为非整合型慢病毒(Non-integrating lentivirus,简称NILV),是一种源自传统慢病毒的新技术。IDLV的整合功能缺失是由整合酶蛋白中的点突变导致的。整合酶没有了功能,原病毒DNA就不能插入细胞基因组,而是作为游离体存在于细胞核中。随着细胞分裂,原病毒DNA被逐渐稀释并丢失。与传统慢病毒相比,IDLV降低了插入诱变的风险,适用于CRISPR基因编辑、iPS干细胞等。

慢病毒滴度是如何测定的?

使用p24 ELISA法测定慢病毒滴度。该方法的三明治免疫试验可测定HIV-1 核心蛋白p24在慢病毒上清液中的含量水平。我们首先在微量滴定板上加入慢病毒样本,然后每孔加入HIV-1 p24捕获抗体进行孵育,并随后添加生物素化的p24二抗以结合p24一抗。此后,样本中加入的辣根过氧化物酶(HRP)标记的链霉亲和素可特异性结合生物素化的p24二抗。在最后一步中,加入辣根过氧化物酶底物反应液,经HRP催化产生有颜色的产物。每个孔的颜色深度最终反映了慢病毒样本中的p24含量。使用分光光度计测量的样本吸光度数值与重组HIV-1的 p24标准曲线进行对照,然后被换算为对应的慢病毒滴度。

vectorbuilder

(0)

相关推荐

  • 拉替拉韦-raltegravir

    药物名称raltegravir 拉替拉韦化学结构 商品名称Isentress 艾生特适应症HIV给药途径口服靶点HIV-1 integrase inhibitor药物特点HIV-1整合酶是HIV病毒复 ...

  • 生命新知·情报丨新技术可以低成本检测单个细胞的基因活性

    图片来源:pixabay.com 新技术可低成本测量单个细胞的基因活性 美国华盛顿大学的Rosenberg等人报告了一项新技术--基于分割池连接的转录组测序(SPLiT-seq),该技术可以分类和追踪 ...

  • HIV定量检测(病毒载量)

    HIV载量 人类免疫缺陷病毒(Human Immunodeficiency Virus, HIV)属于单股正链核糖核酸(RNA)逆转录病毒科慢病毒亚科,是艾滋病的主要病原体,主要传播途径为性传播.血液 ...

  • 『艾滋病』艾滋病“帮凶”新克星

    在最近出版的美国<科学>杂志上,默克公司的科学家宣布,他们在实验室中发现了两种能遏制整合酶活动的物质.这两种物质是名为二酮酸抑制剂的化合物家族成员.试验表明,它们能阻止艾滋病遗传物质与人体 ...

  • 『艾滋病』新的胞啶核苷制剂具有抗HIV耐药株的活性

    新的胞啶核苷制剂具有抗HIV耐药毒株的活性 美国杜邦制药公司的研究人员近日报道,由一种新的胞啶核苷制剂参与组成的高效抗逆转录病毒治疗方案(HAART),可以有效地抑制对旧有核苷类逆转录酶抑制剂(NRT ...

  • 非定点基因整合技术原理

    非定点基因整合概述 慢病毒 属于逆转录病毒科,名称源自该种病毒长达数年的潜伏期,其中最为人所知的是人类免疫缺陷I型病毒(HIV-1).HIV-1直径约120nm,含两条正链RNA,可有效的进入细胞核中 ...

  • HPV多久才能阳转阴?这得看感染的是哪种类型的病毒

    大多数的 HPV 感染是一过性的,这是 HPV 感染最常见的结局,也就是说,大多数的感染者并不会因为HPV感染致病或者致癌.90% 的 HPV 感染在两年内消退,其消退的时间主要由 HPV 型别决定, ...

  • 如何彻底清除exe类型的病毒-系统城

    移动硬盘有时候会存在着.exe病毒,后缀是.exe病毒一般是以进程的方式运行,当exe文件病毒被激活后,一般会开机后自动加载,所以我们只需要找到操作系统的各个自动加载的地方,然后查看可疑的.exe文件 ...

  • 重磅!牛津大学最新研究:新冠病毒长期全球“蛰伏” 病毒可能并非源自中国!

    英国<每日电讯报>2020年7月5日报道,牛津大学专家认为新冠病毒可能并非源自中国. △英国<每日电讯报>5日报道:牛津大学专家认为新冠病毒可能并非源自中国 牛津大学循证医学中 ...

  • 有效歼灭99.9%新冠病毒 新疗法让病毒全消失

      澳洲与美国的研究团队开发出能够降低99.9%新冠病毒量的实验性抗病毒疗法-基因静默RNA(gene-silencing RNA)技术,能够改善染疫老鼠的存活率及死亡率. 澳洲与美国的研究团队开发出 ...

  • 小鼠尾静脉病毒(腺病毒、慢病毒)注射操作流程

    小鼠尾静脉病毒(腺病毒、慢病毒)注射操作流程

  • 小鼠尾静脉病毒(腺病毒、慢病毒)注射注意事项

    小鼠尾静脉病毒(腺病毒.慢病毒)注射注意事项 一开始最好从小鼠尾静脉的末端开始注射,如果在中前端注射一旦失败这样可以防止注射的数次失败后液体漏出. 注射时手上的感觉很重要,如果针头进入尾静脉,手上会有 ...

  • 比疫苗还灵?新冠新疗法不治病毒,而是消灭病毒的“帮凶”

    南加州大学发表在<生物化学杂志>上的一项新研究,提出了一种针对新冠肺炎的靶向疗法,以一种名为GRP78的侣伴蛋白为靶点. 像GRP78这样的伴侣蛋白是帮助调节蛋白质正确折叠的分子,尤其是当 ...

  • 慢病毒、腺相关病毒及腺病毒特点比较

    慢病毒 慢病毒(Lentivirus,LV)是由人类免疫缺陷病毒(HIV)改造而来的一种病毒载体,属于逆转录病毒.慢病毒可将特定基因片段随机.稳定地整合到宿主细胞的基因组中,实现目的基因的持续稳定的表 ...

  • 初三道法非选择题常见设问类型(附方法及例题)

    在答非选择题的时候,很多学生容易在这几点上出错: (1)由于设问问法不直接,不懂得转换设问,导致没有审清设问要求: (2)基础知识不扎实,解题时往往丢掉了限制性条件,作答时过于自由.宽泛: (3)分析 ...