皮肤组织学技术总论

总论

一、皮肤活体组织检查

（一）皮肤部位选择

炎症性皮肤病：病变发展阶段原发性损害

疱疹样皮炎]钱币性皮炎及疥疮等，常伴有剧烈瘙痒，因手搔抓而出现糜烂、溃疡、结痂、渗出等改变，此部位不宜作活组织检查

避免选择有瘢痕及炎症后色素沉着的部位

小疱大疱性病变应选择早期损害如浮肿性红斑或新出现的水疱而不是大疱

避免选择陈旧的疱：疱内可能有继发性感染，其基底可能有表皮再生使组织结构复杂化髭大冲锋陷阵病如寻常型天疱疮及中毒性表皮坏死松解症等，先出现的损害可能是水疱或大疱。应选择最小、内容物最清亮的疱，不取结痂、化脓的疱

对环形损害如环状肉芽肿、远性环状红斑等，自环状边缘取材

对片状损害如硬斑病、类脂质渐进性坏死等，从活动性边缘部位取材

某些炎症性皮肤病，需多处取材，特别是皮损处于不同发展阶段的病变如急性痘冲锋陷阵样苔藓样糠疹、白 细胞碎裂性血管炎（如过敏性紫癜），可能同时存在不民发育阶段的损害，应多处取材

如白细胞碎裂性血管炎，若取荨麻疹样、非出血性丘疹，仅在血管周围见到中性粒细胞及核尘，血管壁上无纤维素沉积；若取出血性丘疹及水疱，可见以上所有特点、、

皮肤肿瘤：包括周围政党皮肤

（二）取材方法选择

1 削法

手手术刀或消毒刀片与皮肤表面在大致平行方向上削去病变组织。适于个别病例，不适于恶性肿瘤及向内生长的皮肤肿物及炎症性皮肤病

2环钻法

用环钻（直径2~8毫米）钻入皮肤取材。最常用。但不适于脂膜炎症。

3 手术切除法

用手术刀作梭形切除病变组织。适于脂膜炎及秃发和皮肤肿瘤（角化棘皮瘤、幼年性良性黑素瘤）

对活组织杜甫不能用镊子夹，特别是环钻法取材的标本；

活组织应包括正常皮肤

术前局麻药注射应在病变下方或周围

二、皮肤组织标本处理

10%中性缓冲甲醛固定

冬天：90毫升固定液加95%酒精10毫升

直接免疫荧光：一半放入甲醛液作HE染色

一半为Michel液：硫酸铵55克溶于100毫升缓冲液（含0.1M N--乙基顺丁烯二酰亚胺，87.5毫升蒸馏水，用1M氢氧化钾调pH至7.0

或用改良缓冲液：

硫酸铵55克，叠氮钠0.05克，蔗糖7克，甘油3毫升，酚红0.001克，0.05M PBS（pH7.0)100毫升，以1M氢氧化钾调pH至7.0

取材当天作直接免疫荧光，放生理盐水或0.01M pH7.0 PBS

真菌培养：

放真菌培养基

酶：放入湿纱布作冰冻切片

电镜：戊二醛等固定液

固定：时间足够长（室温下固定一周）

4毫米厚组织，至少8小时

6毫米厚组织，至少12小时

大的肿瘤标本：切成小块再固定

切片：5~7微米

染色：

苏木精伊红染色：大多数

细胞核蓝色，细胞浆及结缔组织、肌肉、神经呈红色，红细胞为亮粉红色

少数：特殊染色

免疫组化：

特殊染色：少数

特殊染色一览表

染色方法	染色目的	染色结果
Masson三色染色	胶原纤维	胶原纤维蓝色，核黑色，胞浆、肌肉和神经红色
Verhoeff-van Gieson染色	弹力纤维	弹力纤维蓝黑色或黑色，胶原纤维红色，胞浆和肌肉黄色
镀银法	网状纤维	网状纤维、黑色素及神经黑色，胶原纤维紫色，核及胞浆灰色
Wilder染色	网状纤维	网状纤维黑色，胶原纤维玫瑰红色，其他组织红色
Fontana-Masson氨银法	黑色素	黑色素黑色，核粉色
六胺银法	真菌，Donovan小体	真菌、Donovan小体黑色
PAS	真菌，中性黏多糖	真菌、基底膜、含中性黏多糖的黏蛋白、糖原、纤维素及网状纤维呈玫瑰红色至紫红色
阿利新蓝染色	酸性黏多糖	酸性黏多糖蓝色
甲苯胺蓝染色	酸性黏多糖	酸性黏多糖呈紫红色，利什曼原虫、嗜酸性细胞颗粒呈红色
Fite染色	耐酸杆菌	耐酸杆菌如结核杆菌及麻风杆菌呈红色
Oerl亚铁氰化钾染色法	含铁血黄素	含铁血黄素蓝色
Ziehl-Neelsen染色	耐酸杆菌	耐酸杆菌如结核杆菌及麻风杆菌呈鲜红色
碱性刚果红染色	淀粉样蛋白	淀粉样蛋白在偏振光下呈绿色双折光，普通光镜下呈淡粉至红色
结晶紫染色	淀粉样蛋白	淀粉样蛋白呈红色，其他组织成分蓝色
胶样铁染色	酸性黏多糖	酸性黏多糖呈深蓝色，胶原纤维红色，胞浆及肌肉呈黄色
Von Kossa染色	钙	钙黑色
猩红染色	脂质	脂质红色
苏丹黑B染色	脂质	脂质 黑色
Bodian染色	神经纤维	神经纤维、核呈黑色，髓鞘、肌肉、红细胞呈红色
Warthin-Starry染色	螺旋体Donovan小体	螺旋体如梅毒苍白螺旋体，Donpvan小体呈黑色
磷钨酸苏木精（PTAH）染色	肌肉、纤维素	肌肉、纤维素、核和胞浆呈蓝色，胶原纤维、网状纤维及基底膜呈红至棕红色
Gram-Weigert染色法	细菌	阳性菌蓝色，阴性菌红色
地衣红染色	弹力纤维	弹力纤维呈深棕色
间苯二酚品红染色法	弹力纤维	弹力纤维呈紫色