PD-1/VISTA双人源化小鼠模型

品系背景： C57BL/6N

品系构建策略：

PD-1/VISTA双免疫检查点人源化小鼠模型（hPD-1/hVISTA）由hPD-1小鼠和hVISTA小鼠杂交得到。hPD-1和hVISTA的表达均受小鼠内源性启动子调控。

品系说明：

hPD-1和hVISTA在小鼠体内具有正常的生理表达和调节模式。

PD1和VISTA胞外域人源化，利于hPD-1和hVISTA靶向药物的识别。

保留小鼠PD-1和VISTA胞内域，保证正常的胞内信号转导。

小鼠靶基因不表达，避免交叉反应。

小鼠的免疫系统功能健全。

研究应用：

本模型可用于评估hPD-1和/或VISTA靶向药物在免疫健全小鼠体内的有效性及安全性。

与人源肿瘤细胞系 MC38-hPD-L1联用：

构建同源肿瘤模型，以测试靶向hPD-1和hPD-L1的联合疗法的疗效。

模型验证：

图1. hPD-1/hVISTA小鼠的hPD-1表达模式与野生型小鼠的mPD-1表达模式相同。αCD3/αCD28刺激脾细胞表达PD-1，人源PD-1和鼠源PD-1在hPD-1/hVISTA小鼠的Tregs（图A）CD4+T细胞（图B）中的表达。人源PD-1在hPD-1/hVISTA小鼠的CD8+T细胞（图C）中表达，鼠源PD-1在WT小鼠的CD8+T细胞（图D）中表达。

图2. hVISTA在hPD-1/hVISTA小鼠中的表达模式与mVISTA在野生型小鼠中的表达模式一致。hVISTA和mVISTA在新鲜分离的Treg、传统CD4+和CD8+T细胞上的表达。

图3. 人VISTA抗体＋小鼠PD-1抗体联合治疗的抗肿瘤效果。在野生型和VISTA人源化小鼠皮下移植MC38肿瘤细胞系，待MC38细胞系成瘤后用鼠源PD-1抗体或/和人源VISTA抗体尾缘静脉注射成瘤后的野生型和VISTA人源化小鼠。在野生型小鼠中，鼠源PD-1抗体能够抑制肿瘤增殖；在VISTA人源化小鼠中，人源VISTA抗体能够很好的抑制肿瘤增殖，人源VISTA抗体和鼠源PD-1抗体联合治疗能够更有效的抑制肿瘤在VISTA人源化小鼠体内生长。

图4. pembrolizumab治疗PD-1人源化小鼠的抗肿瘤效果。在野生型和PD-1人源化小鼠皮下种植GL261小鼠神经胶质瘤细胞，检测不同药物处理下对小鼠的存活率的影响。在野生型小鼠中，人源和鼠源的PD-1抗体对小鼠的存活率没有明显影响；在PD-1人源化小鼠中，人源PD-1单抗药pembrolizumab的处理能够抑制肿瘤生长，延长小鼠生命。