红细胞or真菌?检验人火眼金睛辨真伪
作者:上海市金山区亭林医院检验科 张国华
前言
尿常规检查是检验科三大常规检查之一,它的的检查项目包括尿蛋白、尿糖、尿隐血、尿红细胞、尿白细胞、尿酸碱度、尿透明度、尿比重等等。目前为止,尿常规检查已成为评估身体健康、了解疾病状态,特别是在诊断肾脏疾病方面作为一种最常用且无法替代的检查项目。尿常规检查通常分为两种方法,即尿干化学分析仪法(仪器法)和显微镜法(手工法)。随着科学技术的进步,传统的手工法逐渐被淘汰,取而代之的是越来越先进的仪器。上海市金山区亭林医院检验科采用的是UF-1000i全自动尿液分析仪检测尿常规。
案例经过
一天中午,我在对一份尿常规标本的检验结果进行审核时,惊奇的发现了尿液红细胞(尿隐血)、白细胞的尿干化学结果皆为阴性,而尿沉渣分析仪定量检查中的尿液红细胞却高达279.3个/ul(正常范围为0~30.7个/ul),见图1。我发现这个结果非常可疑,于是离心镜检,终于发现了端倪。
图1
离心后的尿液显微镜检查见图2,到底是红细胞还是真菌呢?跟我值班的同事认为是一个出芽的红细胞,而根据图片中这个“红细胞”的折光性和形态来看,我认为是真菌。为了说服同事,我做了一个破碎试验:尿液标本中加入NaOH溶液(强酸强碱可以破坏细胞),若完全破碎消失的就是红细胞,而形态完整的则是真菌。
图2
最终发现不但没有被破坏,而且基本上是毫无变化,见图3。
图3
同事还是不肯服输,为了打消他的疑虑,我使出了最后一招:染色法,也就是我们常用的瑞氏染色法与革兰染色法。染色后发现,瑞氏染色法没有发现红细胞(见图4),革兰染色法则提示为革兰阳性酵母菌(见图5)。
图4
图5
案例分析
⑴尿液红细胞和真菌的形态鉴别:尿红细胞形态为双凹圆盘状,遮光性较弱,加碘没有明显变化,加酸则可以溶解;而真菌的形态是圆形或椭圆形,无凹面,折光性很强,可呈串珠状排列或菌丝,加碘可以染成棕色,加酸则不会溶解。[1]虽然典型的尿红细胞和典型的真菌在辨别上并不困难,但是肾小球性红细胞(G1、G4)跟真菌在形态上的鉴别还是非常困难的,可以加酸或加碱来识别,有条件的话还可以做瑞氏染色、革兰染色和药敏试验,当然这种方法比较费时。
⑵UF-1000i全自动尿液分析仪原理:采用电阻抗原理结合流式细胞术,即机器对尿液细胞进行荧光染色,然后测量相应的荧光强度和荧光脉冲宽度,再进一步测量其前向散射光强度和脉冲宽度,最后对尿液的有形成分比如红细胞、白细胞进行相应的计数和鉴别[2]。虽然这种方法比较方便且快速,但是有时候机器对红细胞和真菌容易搞混淆,本案例把真菌当成红细胞就是一个最好的例子。
⑶尿常规检查两种方法的比较:尿干化学法自动化程度高、操作简单且快速[3],干化学法在一定程度上可以弥补显微镜法不能检出的破坏的白细胞的不足,所以可以作为尿液细胞镜检的筛选方法或者辅助方法;但是有时候分不清红细胞和真菌,近年来也屡见有关菌尿对尿液有形成分分析仪检测尿红细胞的影响等研究报道[4-5]。显微镜法准确率高,然而很容易受到多种因素的影响,并且手工镜检花费的时间较多,使用仪器尿干化学检验可对尿液常规检查起到筛选作用[6],从而解决人力资源不足。总而言之,尿液干化学分析仪法联合显微镜法检查尿常规是最可靠的方法。
总结
作为一名合格的检验工作者,我们必须要明察秋毫,认真审核检验结果,绝不能放过任何一个可疑的标本,毕竟再先进的仪器也需要人工来操作,任何时候机器都不可能完全取代人工。当尿液干化学法与尿沉渣分析仪检测结果相差较大时,会使临床医生对尿红细胞的来源产生误判,如果我们练就一双火眼金睛,可以减少甚至杜绝这种情况的发生,从而可以与死神对抗,为患者争取生机。
参考文献
[1]郑春英.尿液中真菌与红细胞鉴别[J].医学理论与实践,2005,18(3):259
[2]王慧,许斌. 尿液中结晶和酵母菌对UF-500i全自动尿沉渣分析仪检测红细胞的影响临床研究[J]. 名医,2019(04):122-123.
[3] 杭建峰,孙朝晖,石玉玲,等.SysmexUF-1000i全自动尿沉渣分析仪的性能分析及临床应用[J].检验医学,2011,26(2):108-110.
[4]马骏龙,丛玉隆.菌尿对尿液分析仪测定红细胞的影响[J].中华医学检验杂志,1999,22(4):205-207.
[5]郑沁,赵儒,黄茜等.细菌或真菌对UF-1000i尿沉渣分析仪红细胞检测的影响[J].检验医学,2012,27(8):663-666.
[6]茅莉,尿液干化学分析仪检测法与传统显微镜手工检测法在尿常规检验中的应用价值对比分析[J].中外女性健康研究,2018(19):185-186.