western blot蛋白印迹显色偏暗或黑色怎么办?

我们在通过western blot检测蛋白表达显影的时候往往会出现显色失败的问题,其实这是显色液的问题,小编经过一个下午的努力终于找到了解决的方法,下面给大家讲解一下吧。

首先我们经过一天的western blot将样本指标转移到裁剪好的PVDF膜上准备显色。

这个时候会发现膜的位置全是黑色,并且有些部分是白色。

黑色的部分是显色液不足导致的,白色是因为浓度太高所以要降浓度。

我们重新配好显色液,然后滴加到PVDF膜上,正反都加一遍,注意避光操作。

在滴加的时候可以看到荧光的条带,说明滴加正确,我们将条带放好,上方是内参下方是样本。

这样再次显色背景就不会偏暗,能够看清楚了。

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