组培大讲堂之专利技术分享——黄花梨木
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技术背景
黄花梨木(Dalbergia odorifera T. Chen)。学名为降香黄檀木又称海南黄檀木,中文学名:降香黄檀,别名:海南黄檀、海南黄花梨、花梨。蝶形花科,黄檀属,为豆科植物,海南黄花梨是极其珍贵的木种之一,是明朝皇家的御用原料。具有独特的香味,在《本草纲目》中对海南黄花梨有着如下记载:海南黄花梨有舒筋活血,降血压、降血脂的作用。用海南黄花梨木屑填充做成枕头更有舒筋活血之功效。海南黄花梨木屑木粉,有一种神秘的悠悠降香味,会让人上瘾,舒筋活血并改善睡眠,降气散淤、止血定痛。现代科学研究证明,从黄花梨木中提炼出的精油,可以刺激细胞再生与代谢,有利于干燥肌肤的滋养;对皮肤具有优异的抗皱功能,能促进皮肤组织再生和增强皮肤弹性。该精油还具有抗菌、杀虫、缓解紧张情绪的功能。焚烧黄花梨木,可以起到薰香的作用。比如老年人或身体虚弱者的卧室,需要长期调养的老弱妇孺的卧房,都可以通过焚烧黄花梨木起到日常调理的作用。
近年来随着对其经济价值及药用价值的认识,黄花梨木的砍伐日益严重,野生资源遭到严重的破坏。黄花梨木生长缓慢,从种植到心材的形成需要多年的时间,濒临灭绝,是亟待拯救保护的特有濒危药用植物。因此,研究一种提高黄花梨木组织培养快繁方法具有重要意义。
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具体实施方式
1、外植体的选择与消毒
取花梨木种子作为外植体,在添加了2-3滴吐温-20的100mL30%巴氏消毒液里灭菌5~8min、无菌水冲洗3-5次,最后用消毒滤纸除去表面水分,得到外植体,其中无菌水为经高压灭菌的蒸馏水;
2、外植体萌发获得无菌试管苗
将步骤(1)得到的外植体接种到基本培养基,在培养温度为23-27℃,光照强度1500lux,光照时间为8-10小时/天的条件下培养30天得到无菌试管苗,其中,基本培养基为在MS培养基中添加了0.5 mg/L的赤霉素GA3、2.0 g/L活性炭AC、30 g/L蔗糖和5 g/L的琼脂,培养基的pH值为5.8;
3、试管苗丛生芽快速繁殖培养
将步骤(2)中得到的无菌试管苗置于繁殖培养基中,在培养温度23-27℃,光照强度1500lux,光照时间为8-10 h/d的条件下培养40天得到试管苗丛生芽,其中繁殖培养基为在MS培养基中添加了1.0 mg/L的玉米素ZT、0.4 mg/L的激动素KT、0.5 mg/L的吲哚乙酸IAA、30 g/L蔗糖和5 g/L的琼脂,培养基的pH值为5.8;其中,1.0 mg/L的玉米素ZT的意思为在1L的MS培养基中添加1.0mg的玉米素ZT,其他物质的添加同理。
4、丛生芽壮苗培养
将步骤(3)中得到的试管苗丛生芽置于壮苗培养基中,在培养温度23-27℃,光照强度1500lux,光照时间为8-10小时/天的条件下培养30天得到健壮植株,其中,壮苗培养基为在MS培养基中添加了2.0 mg/L的6-苄基腺嘌呤6-BA、0.5 mg/L的NAA、25-30 g/L蔗糖和5 g/L的琼脂,培养基的pH值为5.8。
5、移栽
将步骤(3)中得到的健壮植株置于MS生根培养基中,在培养温度23-26℃,光照强度1400-2000lux,光照时间为10-12小时/天的条件下培养40天得到带根的完整植株,其中,MS生根培养基中添加了1.0 mg/L的IBA、2.0 mg/L的NAA、25-30 g/L蔗糖和3.8-4.8 g/L的琼脂,培养基的pH值为5.8。
6、炼苗与移栽
步骤(5)获得带根的完整植株后,在室温为25°的室内打开瓶盖,在瓶中加入少量自来水,炼苗2-4天,表面角质形成后将苗取出,洗净根部培养基,立即移栽到通风良好且弱光的沙土壤中,在沙土壤中生长一个月后移栽大田。移栽后一个星期内,每天早8点到晚6点喷雾3-5次,每次10min,此后每天早8点、晚6点各喷雾1次,每次10min;移栽时的温度条件为20-28℃,相对湿度75-80%,遮阳率为70%。移栽后,浇透定根水,而后每天早晚各淋水一次,移栽黄花风铃木苗20天后,每隔七天喷施0.1-0.3%磷酸二氢钾叶面肥,并且定时浇营养液。
来源:广西壮族自治区农业科学院