腺相关病毒包装滴度测定方法

腺相关病毒包装滴度测定(采用Q-PCR法)

1)取20ul 浓缩病毒液,加入1ul RNAse-free DNAse,混匀,37℃水浴反应 30min。

2)4℃,12 000 rpm/min,离心10 min,取10ul 上清到另一个无菌的1.5ml EP 管 中。

3)加入90ul Dilution Buffer(1 mM Tris-HCl, pH 8.0,0.1 mM EDTA,150 mM NaCl),混匀,37℃金属浴反应30min。

4)自然冷却至室温,加入1ul 蛋白酶K,65℃水浴反应1h。

5)100℃金属浴反应10min,自然冷却至室温。

6)进行Q-PCR 检测滴度。

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