黄芩多糖的提取及其生物活性研究

【摘要】：植物多糖是普遍存在于自然植物界中的由许多相同或不同的单糖以α-或β-糖苷键所组成的化合物。植物多糖作为一类重要的天然活性物质，其最大优点是毒副作用小，来源广泛，具有多种生物活性，如抗肿瘤、降血糖、降血脂、抗氧化、抗病毒和抗辐射等。因此其应用具有广阔的发展前景。由于黄芩中的主要成分是黄酮类化合物，因此国内外学者主要是对黄酮类化合物进行研究，较少见对黄芩多糖的研究。 1.黄芩多糖提取纯化的研究。采用微波辅助技术提取黄芩多糖，通过单因素试验研究了液固比、提取时间、提取温度对黄芩多糖提取率的影响，采用二次回归正交旋转组合设计对微波辅助提取黄芩多糖的工艺参数进行优化，优化结果为：固液比1:34，提取温度91℃，提取时间100min，在此条件下，黄芩多糖提取率达到89.97%。 对黄芩粗多糖采用Sevag法除蛋白，结果表明，对黄芩粗多糖采用Sevag法除蛋白6次即可达到比较好的效果，蛋白脱除率为82.09%，多糖损失率为28.66%。对脱蛋白后的黄芩多糖用活性炭脱色，超滤法除去小分子杂质，得到纯度较高的黄芩多糖，纯度为95.27%。 2.黄芩多糖体外抗氧化活性的研究。从还原力、清除DPPH自由基、清除超氧阴离子自由基和清除羟基自由基四个方面研究了黄芩多糖的体外抗氧化活性，并与Vc进行比较。结果表明，黄芩多糖对上述自由基均有不同程度清除作用，其还原力较低；对DPPH自由基的清除率是90.54%，能力略低于Vc；对超氧阴离子清除能力强于Vc，EC50为0.261mg/mL；对羟自由基的清除能力低于Vc，EC50为0.724mg/mL。黄芩多糖具有一定的体外抗氧化能力。 3.黄芩多糖体内抗氧化活性的研究。用试剂盒测定小鼠血清、肝、脾、肾组织中的蛋白质含量、MDA含量、SOD活性和GSH-Px活性。结果表明，黄芩多糖可显著提高小鼠血清、肝脏、脾脏和肾脏中的蛋白含量、GSH-Px活性和SOD活性，还可显著降低小鼠血清、肝脏、脾脏和肾脏中的丙二醛含量，说明黄芩多糖具有一定的体内抗氧化活性。 4.黄芩多糖免疫调节活性的研究。通过动物试验，检测小鼠血清免疫球蛋白(IgG、IgA、IgM)含量，补体C3、C4的含量和溶菌酶活性，并测定胸腺指数与脾脏指数。结果表明，黄芩多糖能增加小鼠胸腺重量，显著增加小鼠脾脏重量；增加小鼠血清中IgG含量，显著增加小鼠血清中IgA含量与IgM含量；显著增加小鼠血清中补体的含量；显著增加小鼠血清溶菌酶活性。说明黄芩多糖具有增加机体免疫功能的作用，并在一定程度上对小鼠的体液免疫有所增强，还能激活并提高小鼠非特异性免疫反应。