浅析记忆障碍动物模型的建立方法和注意事项

形成记忆障碍动物模型的方法很多，主要有:电休克，脑部缺血、缺氧，某些化学药品，应激，剥夺睡眠，老年动物，有遗传缺陷的动物。

一、实验方法

完整的记忆过程包括记忆获得、巩固与再现三个阶段。不同类型的记忆障碍模型可分别观察药物对上述三个阶段的影响。形成记忆障碍的方法很多，主要有：电休克，脑部缺血、缺氧，某些化学药品，应激，剥夺睡眠，老年动物以及有遗传缺陷的动物等。下面分别介绍记忆获得障碍、记忆巩固障碍和记忆再现缺失动物模型的形成方法。

1

记忆获得障碍

抗胆碱能药物影响记忆的机制比较清楚，结果确切且易于重复，并且无明显非特异性作用，用此类药物来造成记忆获得障碍模型是较为理想的，因此在国内外得到广泛采用。最常用的抗胆碱药物是东莨菪碱，其次为樟柳碱。于训练前30min经腹腔注射给药一次，剂量为2～4mg/kg体重，可显著破坏动物学习和记忆的获得。利血平、戊巴比妥钠、氯丙嚓、利眠宁等中枢抑制剂均可明显抑制记忆的获得。

2

记忆巩固障碍

常用的方法有电休克，缺氧和给予蛋白质合成抑制剂等。

①电休克：动物训练结束后立即将电极接于其头部和鼻部，给予一强度为7mA的电流刺激，持续1s，24h后重作测验，动物的记忆将不再保持。
②缺氧：造成缺氧的方法有以下几种：训练后立即将小鼠置于密闭的罐子里，通以96.2％N2和3.8％O2的混合气体，直至动物倒地意识丧失时为止；给动物吸入纯CO2；皮下注射NaNO2(120mg/kg体重)。这些方法均可破坏记忆的巩固。
③蛋白质合成抑制剂；常用的药物有环己酰亚胺、氯霉素、茴香霉素等。其中以环己酰亚胺的作用易于重复，结果可靠。用药剂量为120mg/kg体重，于训练后立即或训练前10min腹腔注射一次，即可破坏记忆的巩固。

3

记忆再现缺失

经训练的小鼠于重测前30min经腹腔注射40％～45％乙醇(0.1ml/10g体重)，可明显干扰记忆的再现。乙醇价廉易得，结果稳定，易于重复，对中枢和一般运动功能无明显影响。但其影响记忆的确切机制还不清楚。

二、给药方案

采用不同的给药方案和不同类型的记忆障碍模型，可分别观察药物对学习效应和记忆不同阶段的影响，从而可更全面地了解受试药物作用的性质和特点。可采取训练前、训练后以及重测前给药的方法。

训练前给药：于训练前几天给药可观察药物对长期学习效应的影响；训练前数分钟内给药可观察药物对学习成绩和记忆获得的影响。
训练后给药：于训练后立即或短时间内给药可观察药物对记忆巩固作用的影响，训练后几天继续给药可观察药物对记忆保持的作用。
重测前给药：经过训练，动物于重测前数分钟内给药可观察药物对记忆再现的影响。
但上述给药方案不是绝对的。有些学习、记忆实验，动物需经过多次或多天训练才能学会执行某一操作(如Morris水迷宫)。因此，药物的效果很可能是对学习、记忆获得和记忆保持的综合作用结果。

大小鼠Morris水迷宫实验系统，型号：XR-XM101

三、注意事项

• 学习、记忆试验应在隔音室或半隔音室内进行，实验时要保持环境安静，室内温度、湿度和光照度应适宜并保持一致；

  实验动物:最好采用纯种动物，实验前数天将动物移至实验室以适应周围环境；

• 实验者必须天天与动物接触如喂水、喂食和抚摸动物。动物在24h内有其活动周期，即不同时相处于不同的觉醒水平，故实验应选择适宜时间进行，前后两天的实验要在同一时间内完成；

  减少非特异性干扰:如情绪、注意、动机、觉醒、运动活动水平、应激和内分泌等因素；

• 奖励或惩罚效应:采用奖励效应应特别注意“动机”和“驱力”的问题;采用惩罚效应要特别注意药物引起动物镇静、痛闹改变等问题；

• 药物作用的多重性:药物往往具有多方面的作用，有的作用易化记忆过程，而有的作用阻抑记忆过程;或在给药后不同时间分别产生不同的作用，以致在某一时间内出现记忆改善，而在随后的某一时间内记忆减弱；

• 动物种属差异和脑内不同部位给药引起的差异:某些药物在一定动物种属产生阳性结果，而在另一些动物种属则否。另外，不同种属动物各具特殊的学习能力。这些都说明动物种属的选择十分重要。许多研究工作还指出，同一药物在脑的不同部位产生不同的作用，提醒我们在分析实验结果时要考虑到有关因素；

• 状态依赖性:不能完全由一种状态向另一种状态转化的反应叫做状态依赖，这种现象叫状态依赖性学习(SDL)。在所有学习、记忆实验中都应考虑或排除SDL的存在；

四、结果评价

一个药物是否有效，至少要满足以下几个条件：

①结果经得起重复。

②药物有量一效关系或其作用规律。

③在不同类型实验方法和不同类型动物模型中均显示效果，并且在作用性质和方向上相吻合。

扫取二维码获取

更多实验方法

动物神经科学与行为学