人胃癌裸鼠实验技术原理

人胃癌裸鼠模型方法：收集培养的BGC-823细胞在细胞培养至对数期时，用RPMI-1640培养液中，制成约2*10 7个/ml细胞悬液，取0.2ml注入裸小鼠颈部皮下或背部皮下，每组接种三只鼠，当皮下移植瘤长至直径为1cm左右时取出肿瘤，及时放入含无血清培养液的平皿中，再修剪肿瘤组织，去除脂肪，结缔组织及坏死肿瘤组织，并用无血清培养液洗涤2次，将瘤组织切成约1mm x1mm x2mm的小块，加入适量的pbs备用。以Pentobarbital经腹腔注射麻醉裸鼠，常规背部肩胛区，用无菌套管针抽吸准备好的2立方毫米大小瘤块，将其接种于裸鼠背部肩胛区皮下，建立裸鼠皮下移植的人体胃癌裸鼠模型。

人胃癌裸鼠模型特点：胃癌细胞接种后第三天即可见到裸鼠接种处皮下出现结节，直径约1.5mm，质地较硬，在以后的几天中，上述皮下结节没有继续增大，此阶段为肿瘤细胞生长的潜伏期。随后，裸鼠皮下的肿瘤结节开始缓慢生长，体积逐渐增大。

注意：如每次需要接种的数量太多时，可用瘤细胞悬液接种。停止给予受试物之次日处死动物，先称体重，后解剖皮下瘤块，称重。如对照组小白鼠肿瘤平均重量小于1g或20%鼠的瘤重小于400mg，大白鼠肿瘤平均重量小于2g，表示人胃癌裸鼠模型肿瘤生长不佳。在实验期给受试物组鼠死亡超过20%，或平均体重下降超过15%者，表示受试物的毒性反应。