HRP标记山羊抗小鼠IgG 使用须知事项
山羊抗小鼠IgG(H&L)HRP标记抗体是以小鼠IgG(H&L)为抗原的HRP山羊多克隆抗体,可以特异性结合小鼠IgG(H&L)。山羊抗小鼠IgG(H&L)Chemicalbook(HRP)主要用于ICC/IF,Dotblot,ELISA,IHC-P,IHC-Fr,Immunomicroscopy,WB等小鼠IgG(H&L)检测实验。
HRP(Horseradish Peroxidase,辣根过氧化物酶)是一种分子量达44000的糖蛋白,由无色的酶蛋白和深棕色的铁卟啉结合而成,通常来源于辣根植物中,是临床检验试剂中的常用酶。辣根过氧化物酶(Horseradish Peroxidase,HRP)比活性高,稳定,分子量小,纯酶容易制备,所以最常用。HRP广泛分布于植物界,辣根中含量高,它是由无色的酶蛋白和棕色的铁卟啉结合而成的糖蛋 白,糖含量18%。由于其易于提取、价格相对低廉,同时性质稳定,耐热及有机溶剂的作用,与抗原或抗体偶联后,活性很少受损失,因此是迄今为止在免疫学中应用最为广泛的一种标记用酶。HRP的催化底物包括色原底物、化学发光底物等,其中最常用的色原底物有邻苯二胺(OPD)、2,2’-吖嗪-(3-乙酰苯 基噻唑磺酸-6)(ABTS)、四甲基联苯胺(TMB)和4-氨基安替比林:苯酚耦联底物对等;而化学发光底物则包括Luminol/增强剂等系统。
山羊抗小鼠二抗用于Western、ELISA和IHC等的二抗。 与小鼠IgG分子有特异性反应,与其它小鼠免疫球蛋白(包括IgM、IgE、IgD、IgA等)的轻链有交叉反应。该二抗与血清内非免疫球蛋白无交叉反应,但可能与其它种属的免疫球蛋白有交叉反应。
此辣根过氧化物酶标记山羊抗小鼠IgG(H+L)用于WB、ELISA和 IHC的推荐稀释比例为:WB(1:10000 - 1:200000)、ELISA(1:5000 - 1:100000) IHC(1:500 - 1:5000)。
使用说明:
1、此抗体为用纯化的小鼠IgG免疫山羊,然后用亲和纯化柱对获得的抗血清进行纯化,并经过人IgG吸附纯化的优质二抗。对人IgG几乎没有结合能力。
2、此抗体如果用于常规的Western检测,以每次检测需5毫升1:1000 稀释的二抗计,至少可以检测20次。
使用方法:
1、Western、ELISA或IHC请参考相关实验步骤进行。起始稀释浓度按照推荐的稀释比例进行稀释。
2、叠氮钠会抑制辣根过氧化物酶的活性,在含有辣根过氧化物酶的二抗中不可加入叠氮钠。