CRISPR/Cas9技术在Vero细胞中的应用

严重急性呼吸综合征冠状病毒-2（SARS-CoV-2）是2019年新冠病毒（COVID-19）的病原体，它引发了这个世纪以来影响力最大的公共卫生危机。在写下这句话时，全球已经有超过750万人被感染，超过42万人因感染而死亡，而当你看到这里时，这个数据还在增长着。一个有效的疫苗是人类打赢这场恶战的有力武器，而确定感染所必需的宿主因子，对于了解COVID-19的发病机制、揭示宿主易感性的变化以及确定新的宿主导向疗法（可能对当前和未来的大流行性冠状病毒有效）至关重要。而CRISPR-Cas9技术对于基因组的精准编辑能力让它成为了主要研究手段之一。

Vero-E6细胞对 SARS-COV-2 感染和病毒诱导的细胞病变效应高度敏感，Wei, Jin等人在Vero-E6中进行了两个独立的全基因组CRISPR筛查，并且使用了两种不同 Cas9 核酸酶构建体（Cas9-v1 和 Cas9-v2）的 Vero-E6 系。他们评估了其中25个基因，包括亲病毒和抗病毒基因，见图1。他们发现亲病毒和抗病毒基因对理解COVID-19的发病机制、治疗方法和疫苗设计具有重要意义，例如SMARCA4可以促进肺泡上皮细胞的增殖，并防止肺纤维化（SARS-CoV和SARS-CoV-2的常见病症）^[4]。

图 1 全基因组 CRISPR 筛选可识别对 SARS-CoV-2 诱导的细胞死亡至关重要的基因