CAR-T Cells Therapy！Get out! Cancer!
CAR-T，全称是ChimericAntigen Receptor T-Cell Immunotherapy，嵌合抗原受体T细胞免疫疗法，是⽬前较为有效的恶性肿瘤治疗⽅式之⼀，在已报道的公司进⾏的I期临床试验中，临床缓解率绝⼤部分能达到80%以上。典型的CAR-T治疗流程包含五个步骤：1、分离，从癌症病⼈⾝上分离免疫T细胞；2、修饰，⽤基因⼯程技术给T细胞加⼊⼀个能够识别肿瘤细胞并且同时激活T细胞的嵌合抗体，也即制备CAR-T细胞；③扩增：体外培养，⼤量扩增CAR-T细胞。⼀般⼀个病⼈需要⼏⼗亿，乃⾄上百亿个CAR-T细胞（体型越⼤，需要细胞越多）。④回输：把扩增好的CAR-T细胞回输到病⼈体内。⑤监控：严密监护病⼈，尤其是控制前⼏天⾝体的剧烈反应。
CAR-T疗法不不同于传统药物，是一种基于整合了了CAR基因的自体T细胞疗法。这意味着CAR-T必须在尽可能短的时间内完成抽血、分离、激活、转染、扩增、制剂、放⾏、冻⼲、运输和给药。
⼯程菌库构建 → ⽬的质粒及辅助质粒⽣产 → 质粒转染⼯作细胞制备慢病毒原液 → 慢病毒转染T细胞将CAR分⼦引⼊ → CAR-T制剂。下列三个图示很形象的从三个维度诠释了CAR-T制剂的生产过程。
2012年的时候，美国有个⼩⼥孩叫Emily，她得了了一种非常罕⻅的儿童白⾎病，她经历了当时的标准疗法就是化疗。⼀年后，她很不幸地成为了那20%、30%会复发的病⼈。家⻓没有放弃，到网上去搜索新的临床实验，于是被他找到了⼀个新的还没有人用过的疗法，叫CAR-T免疫治疗，Emily也成为全球首个CAR-T临床病人。这是2012年Emily绝望的时候的状态。一年以后她去复查，one year cancer free，就是身体⾥⾯已经没有癌细胞了。这是两年、三年、四年、五年的时候，今天我们再一次看到了她第六年的照片。小编也因此又写了一篇关于CAR-T的文章💪 💪 💪 💪 💪 💪 💪 💪
2018
毋庸置疑，CAR-T最成功的案例是以CD19为靶点针对B细胞肿瘤的一系列临床试验。CD19广泛表达在多种B细胞恶性肿瘤细胞表面，在正常B细胞, 滤泡性树突状细胞表面也有表达，而在其他组织和血液细胞没有表达，血液中也未曾检测到CD19可溶性蛋白的存在。因此它被认为是CAR-T治疗B细胞肿瘤的理想靶点。临床试验结果显示，CD19 CAR-T对急性B-淋巴细胞白血病（B-ALL）的治愈率已经达到了90%。
基于clinical trials上检索到的CAR-T临床项目进行分析，在临床注册靶点上除了大热的CD19和BCMA靶点外，CD22、Mesothelin、GPC3、CD20、Her2、CD123和CD30也是较为热门的靶点，而目前CD19、CD123、CD30、BCMA、Her2、IL13Rα2和GD2均是临床进展较多的靶点。异体CAR-T细胞及CAR-NK细胞的研究也已进入临床研究。
1CD19
毋庸置疑，CAR-T最成功的案例是以CD19为靶点针对B细胞肿瘤的一系列临床试验。CD19广泛表达在多种B细胞恶性肿瘤细胞表面，在正常B细胞, 滤泡性树突状细胞表面也有表达，而在其他组织和血液细胞没有表达，血液中也未曾检测到CD19可溶性蛋白的存在。因此它被认为是CAR-T治疗B细胞肿瘤的理想靶点。临床试验结果显示，CD19 CAR-T对急性B-淋巴细胞白血病（B-ALL）的治愈率已经达到了90%。
2BCMA
B细胞成熟抗原(BCMA)是一种肿瘤坏死因子（TNF）受体超家族成员的膜蛋白，主要表达于晚期B细胞、短寿命增殖浆母细胞和长寿命浆细胞表面，并在一定程度上存在于记忆B细胞上，而在初始B细胞、CD34阳性造血干细胞和其他正常组织细胞中都不表达。BCMA对长寿命浆细胞存活起重要作用，但对维持正常B细胞稳态来说可有可无。
多发性骨髓瘤（MM）是一种恶性浆细胞病，在血液系统恶性肿瘤中，MM属于第二常见病种。在MM病例中，BCMA在恶性浆细胞上的表达量显著高于正常浆细胞，在高达60%-70%的多发性骨髓瘤（MM）病例中均能发现BCMA的高表达。
目前，BCMA已成为MM和其他血液系统恶性肿瘤的一个非常热门的免疫治疗靶点。针对BCMA，有多种免疫疗法正在开发，包括嵌合抗原受体T细胞疗法（CAR-T）、双特异性抗体（BsAb）和抗体药物偶联物（ADC）等。
3GPC3
CAR-T（Chimeric Antigen Receptor T-Cell Immunotherapy，即嵌合抗原受体T细胞疗法）就属于被动免疫。在肝癌治疗研究中，靶向GPC3的CAR-T是一个研究热点。GPC3全称为磷脂酰肌醇聚糖-3，超过70%的肝癌患者中都可以检测到GPC3的高表达，但在正常组织中几乎检测不到GPC3。因此，GPC3成为CAR-T治疗肝癌的一个重要靶点，相关的研究正在开展。此外，上海交通大学医学院附属仁济医院通过CAR-T治疗晚期肝癌的Ⅰ期试验取得了不错的结果。本项目在翟博主任的领导下，于2015年6月份开始进行探索性临床研究，幸运地是首批参与研究的13名患者中，已经有2名经治疗后3年所有肿瘤相关指标完全正常，这表明了CAR-GPC3 T细胞的确有可能给一些肝癌患者带来长期获益。
4CID技术（HER-2等靶点）
Bellicum的一项核心技术CID（化学诱导的二聚体化技术）是给细胞疗法加入了一个“开关”，通过小分子rimiducid来控制信号通路的开关。该技术可以作为安全开关，rimiducid诱导细胞凋亡（当细胞疗法出现毒性时使用）；也可以作为活化开关，rimiducid诱导细胞更多的增殖（当细胞疗法作用不够强时使用）。细胞疗法一个很大的问题是个体差异大，剂量不好控制，有时候出现严重副作用，有时候又不够强起不到治疗效果，CID使得细胞疗法的应用更加灵活可控并且安全。
5CD20/CD22
CD20（Cluster of Differentiation 20）是一种跨膜磷蛋白，位于B淋巴细胞表面。B淋巴细胞是由骨髓内多能干细胞分化而成，其发育经过祖B细胞（Pro-B），前B细胞（Pre-B），不成熟B细胞（Immature B）以及成熟B细胞（Mature B） 几个阶段。成熟B细胞被释放至淋巴组织，可继续分化为浆细胞（Plasma Cell）。CD20作为B细胞的表面抗原，出现在前B细胞到成熟B细胞阶段，但是CD20并不表达在造血干细胞，祖B细胞以及成熟的浆细胞上。在人体中，CD20表面抗原是由MS4A1基因编码的。
除在正常B细胞中表达外，CD20还在B细胞来源的淋巴瘤、白血病等的肿瘤细胞表达，以及和涉及免疫疾病和炎症疾病的B细胞中表达，所以CD20抗原成为淋巴癌、白血病和某些自体免疫等疾病治疗的目标靶点。
CD22是唾液酸结合免疫球蛋白样凝集素（Siglecs）家族的一个成员，同时也是B细胞表面抑制性辅助受体之一，它与B细胞的发展、分化和功能密切相关。CD22限制性地表达于成熟B细胞和大多数恶性B淋巴瘤细胞表面，使其成为了自身免疫疾病和B细胞恶性肿瘤治疗的热门靶点之一，目前，以CD22为靶点的免疫治疗药物种类有单克隆抗体药物，抗体偶联物（ADC）以及CAR-T疗法。
目前，全球共有两个CAR-T产品获批上市，分别是来自诺华的Kymriah （tisagenlecleucel）和Kite制药的Yescarta（KTE-C19）。Kymriah 获批用于治疗儿童和年轻成人（2~25岁）的急性淋巴细胞白血病（ALL），定价47.5万美元；Yescarta获批用于治疗特定类型大B细胞淋巴瘤，定价37.3万美元。中国CAR-T临床试验已在全球领先，相信在不久以后，中国版CAR-T造福国民！！！