肾移植排斥反应或无需肾穿刺活检：已出现血液和尿液游离DNA检测技术

肾穿刺活检是肾移植急性排斥反应的诊断“金标准”，但这个方法是有创的，而且可能出现并发症，因此探索非侵入性的替代检查手段非常有必要。近两年来，供体来源游离DNA（简称ddcfDNA）迅速成为移植肾损伤检测领域的研究热点，集中数据成果发表让肾移植领域对ddcfDNA在移植肾损伤特别是急性排斥方面的认识不断深入，为推动ddcfDNA成为未来肾移植排斥无创检测的生物标记物奠定了理论基础。

游离DNA（cell free DNA, cfDNA）指来自细胞凋亡或坏死，游离于细胞外的DNA片段，在肾移植患者血液和尿液中，都包含供体肾组织细胞凋亡来源的cfDNA。研究表明，供体来源cfDNA（donor-derived cfDNA, ddcfDNA）带有供体组织的基因信息，通过检测ddcfDNA可获得供体组织的健康状况，具有无创、高灵敏和实时等检测优势。

参考文献：程东瑞等.供体来源游离DNA在移植肾损伤中的研究进展[J].中华器官移植杂志（2019）

器官移植患者血液中和尿液中的cfDNA

患者术后稳定状态下，血液和尿液中ddcfDNA的含量是相对稳定的，而对移植肾的排斥反应，会增加体液中的ddcfDNA含量。基于二代基因测序平台，通过ID-Tag seq技术*，对患者ddcfDNA进行捕获检测，结合生物信息学定量模型HQ-NIT，评估患者排斥反应的严重程度。因为移植肾损伤部位不同，引起的ddcfDNA升高情况也不同，该检测可提示急性排斥的损伤部位。另研究显示，ddcfDNA在评估排斥的治疗效果上也有作用。

国际医学权威期刊《Nature Reviews Nephrology》就在综述中提到，数据表明, ddcfDNA在检测排斥反应上具有很好的诊断性能，特别是其假阴性率低, 可避免临床不必要的穿刺活检。在传统临床诊断发现移植肾损伤之前, ddcfDNA的水平已经开始升高。此外，由于cfDNA的半衰期短，ddcfDNA水平会在排斥治疗成功后迅速下降至稳定水平。ddcfDNA可以检测由于免疫抑制使用不足而引起的免疫激活对移植物的损伤，因此ddcfDNA检测可有助于指导免疫抑制剂的用量。ddcfDNA的背景丰度可能会因受体cfDNA的变化而受到影响（例如感染或运动等情况），但是使用ddcfDNA的绝对值可以解决这个问题。因此，连续的ddcfDNA监测有助于肾脏移植患者的经济有效的个性化临床管理，以减少移植肾功能的过早丢失。

*：ID-Tag seq技术通过富集cfDNA以及降低背景噪声干扰，将二代基因测序背景误差下降1000倍，实现超高测序深度下千分之一低频突变的高精准检出。

检测抗体介导的排斥（Antibody Mediated Rejection, AMR）时，相比供体特异性抗体（Donor Specific Antibody, DSA）等指标，ddcfDNA的阴性预测值相当（~95%），而阳性预测值更高（ DSA PPV =40%，ddcfDNA PPV=90%），可减少不必要的穿刺检查。

奥根诊断游离DNA检测产品奥因MI与现有临床排斥检测方法对比

ddcfDNA无创排斥检测方案尤其适用于出现以下几类临床症状的患者：

一、肌酐不明原因升高；

二、术后移植肾功能恢复评估；

三、抗体阳性，但供体组织的HLA基因分型不明；

四、急性排斥治疗效果评估