用于孤独症小鼠模型的行为检测方法（3）：刻板运动和狭隘的兴趣活动

1.1   刻板理毛行为 

孤独症小鼠经常表现出自发的重复活动，包括自发旋转、挖掘、跳跃、理毛等。其中重复的自我修 饰( 理毛行为) 行为可能造成病理性损伤，如皮肤和毛发的损 伤。理毛行为测试可以在标准鼠笼或旷场内进行，小鼠熟悉 鼠笼环境 10 min 后视频记录 10～15 min( 或者连续记 录 30 min或2 h) 理毛行为发生次数或者持续时间可用于评估孤独症小鼠的刻板重复运动。实验中特别注意实验观察指标，小鼠性别以及环境等因素对理毛行为观察的影 响，具体影响及适宜指标我们之前进行了探究分析: 发现使 用不同的性别、在不同的实验环境下记录理毛行为( 比如在 原始鼠笼录制或者更换新的鼠笼) 、参数是理毛次数还是理 毛时间等对孤独症模型小鼠的理毛行为结果分析都有一定 的影响。因此我们推荐在孤独症模型小鼠理毛行为观察中， 使用同一性别、在原始鼠笼中进行实验、视频录制时间最少15 min、最长2h，以及采用累计理毛时间作为参数对理毛行 为的分析效果更佳。

1.2    固定模式( 学习反转) 测试 

在孤独症模型小鼠中，持 续存在的固定模式行为相对直观，可通过观察小鼠日常行为发现。而刻板思维则需要通过小鼠完成特定任务来衡量。反转学习任务测试可以评估小鼠从既定习惯转变为新习惯的灵活性，反映小鼠的一种刻板思维表现。具体方法为: 首 先为小鼠建立空间记忆，如在 T 迷宫右臂通过食物诱导奖励使小鼠趋向于向右臂运动( 评估参数包括进入右臂的次数，进入之前的停留时间等，以此确定空间记忆建立) ，然后把食 物奖励改放在 T 迷宫左臂，观察记录小鼠是否改向左臂运 动( 评估参数包括进入左臂的次数、进入前停留的时间、速度 的改变等) 。也可以使用水迷宫( 圆形池，直径 120 cm) 测 试，在水迷宫的固定象限里放置逃生平台，训练小鼠能够找到并习惯平台的存在。然后将逃生平台放在另一个象限，观 察小鼠能否再次找到平台( 评估参数包括相比较前次找到平 台的时间有无延长，游泳距离、速度的改变等) 。往往孤独症小鼠模型在初期表现良好但更改食物所处位置或平台后表现为不适应这种改变。

1.3   狭隘的兴趣活动检测 

当小鼠进入一个新的环境后， 倾向于探索新环境的各个方向，会嗅探新的接触物，或者发 现洞穴以后用鼻子探索等。利用这些习性，我们可以使用旷场评估孤独症模型小鼠行为的改变，孤独症小鼠可能更倾向 于探索某一固定象限，狭隘的兴趣活动检测参数，包括实验鼠进入固定象限的次数、停留持续时间等，或者对其中放置 的物体表现出固执的偏爱等，以及接触物体的次数、接触的时间等。上述行为测试方法的比较和衡量等。尽管研究者开发了多种检测小鼠孤独症核心症状的行为学方法， 但如何更加准确评价孤独症相关的小鼠模型以及检测孤独 症相关症状仍然是一大挑战。很多人类孤独症的行为表现很难在小鼠模型身上体现，比如语言能力的降低，对特殊刺 激的反应，缺乏眼神交流等。然而，针对两大核心症状的检 测意义重大，有助于我们验证孤独症相关的基因缺陷，探索 新的潜在的治疗措施等。此外，能够涵盖多种孤独症症状的行为检测方法和手段还有待进一步发现。