Transwell 细胞迁移/侵袭/实验流程
Transwell小室底层的一张有通透性的膜(一般为聚碳酸酯膜),将其放置于孔板中,小室内称上室,培养板内称下室。由于聚碳酸酯膜有通透性,下层培养液中的成分可以影响到上室内的细胞。应用Transwell可研究下层培养液中的成分对细胞生长、运动等的影响。
流程
1 细胞共培养:
(1)在下室中接种能够分泌细胞因子或特定蛋白产物的细胞,在上室中接种效应细胞;
(2)按照实验要求培养一定的时间;
(3)检测效应细胞性能的改变:可通过流式细胞仪检测表面分子、细胞凋亡等;
2 趋化实验:
(1)在上室中接种效应细胞,下室中接种能够分泌特定产物的细胞或加入因子;
(2)计数进入下室的细胞数可反映分泌产物或因子对特定细胞的趋化作用;
3 肿瘤迁移实验:
(1)在上室中接种效应细胞,下室中加入待测样品;
(2)计数进入下室的细胞量,可评价该样品对肿瘤细胞迁移能力的影响;
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