小鼠模型选择指南
KO-First技术是通过在内含子中插入一个两边带有FRT位点的基因破坏盒来达到敲除的目的,这个破坏盒含有Splice acceptor、报告基因和Neo。除此之外,在目的基因敲除的外显子两侧各插入两个LoxP位点。因此得到的小鼠是目的基因敲除同时敲入报告基因与抗性基因的小鼠。
通过灵活选择Flp/FRT重组系统和Cre/LoxP重组系统,可达到同时获得完全性敲除和条件性敲除的实验目的。
1.与Cre小鼠交配可删除Neo基因及Flox区域,成为报告基因和基因敲除小鼠。
2.当该小鼠与Flp小鼠交配时,可还原已敲除基因的表达,获得常规的Flox小鼠,在此基础上Cre小鼠交配又可获得条件性基因敲除小鼠。
简而言之,想在一种小鼠模型上实现完全性基因敲除与组织特异性基因敲除的目的,往往会使用KO-First技术。
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