组织学技术 固定（3）

2 固定液

（1）单纯固定液

由一种固定剂组成的固定液。如10%甲醛水溶液（福尔马林），（10%）中性甲醛，10%甲醛生理盐水溶液，10%甲醛缓冲液，4%多聚甲醛，80%酒精或无水酒精，5%三氯醋酸水溶液，3%重铬酸钾水溶液，1%锇酸水溶液

数量少。常用10%甲醛和中性甲醛，4%多聚甲醛。

●10%甲醛：甲醛10毫升，水90毫升

●甲醛生理盐水：

37~40%甲醛水溶液100毫升，氯化钠8.5克，自来水或蒸馏水900毫升

●中性甲醛液：

37~40%甲醛水溶液100毫升，水900毫升，石炭酸钙或碳酸镁足量

●中性缓冲甲醛液（pH7)

37~40%甲醛水溶液100毫升，水900毫升，磷酸二氢钠（含水）4克，磷酸氢二钠6.5克

●甲醛钙液：

甲醛水溶液10毫升，醋酸钙2克，升汞6克，蒸馏水90毫升

4%多聚甲醛溶液（pH7.2）

称粉末状的多聚甲醛4克，置于三角烧瓶内，加入蒸馏水80亳升，放入37℃恒温水浴锅内，每隔1~2小时摇荡混匀至完全溶解。可加氢氧化钠助溶，并调节pH至7.2
重铬酸钾：

Müller液

重铬酸钾2克，硫酸钠1克，蒸馏水100毫升

渗透力弱。固定数天，每日换新液。固定后流水冲洗24小时。

（2）混合固定液

由两种或两种以上固定剂组成的固定液。

1）甲醛、酒精混合固定液

●Schaffer甲醛酒精混合液：

甲醛10毫升，80%或无水酒精20毫升。

固定1~3天，经80%或95%酒精 和无水酒精脱水，透明，浸蜡，包埋。

对肥大细胞颗粒和黏液固定效果良好。

●甲醛酒精液（FA）

甲醛10毫升，95%或无水酒精90毫升。

固定后入90%酒精脱水。

●酒精 甲醛混合液（AF）：

95%酒精90毫升，甲醛10毫升

固定后直接入无水酒精脱水，透明，包埋。

对肥大细胞颗粒和黏液固定良好。

2）甲醛升汞液

●Worcester甲醛升汞液

将10%甲醛水溶液加升汞至饱和。

固定24小时，再用10%甲醛固定12~24小时。

适于一般组织，效果良好。

●甲醛-醋酸钠（钙）-升汞液

甲醛水溶液10毫升，醋酸钠（钙）2克，升汞6克，蒸馏水90毫升

用时配。

适于固定胰腺（胰岛细胞染色）

3）甲醛苦味酸液

●Rossman液：

苦味酸无水酒精饱和液90毫升，中性甲醛水溶液（40%）10毫升

室温固定12~24小时，95%酒精洗几天。

冰箱内固定24小时，直接入无水酒精脱水，多换几次酒精，

4）甲醛、重铬酸钾液

●Orth液

重铬酸钾2.5 克，蒸馏水100毫升，40%甲醛水溶液10毫升（用时加入）

固定36~72小时，稍大组织36小时，脑组织72小时，一般小组织24小时。

固定后流水冲洗24小时。

●Regaud液

3%重铬酸钾水溶液80毫升，甲醛水溶液（中性）20毫升

5）重铬酸钾锇酸液

●Marchi液

重铬酸钾2克，硫酸钠1克，蒸馏水100毫升，1%锇酸水溶液50毫升

用时配制。渗透力弱，组织厚度2毫米，固定5~8天，最好每2天换一次新液。流水冲洗后入酒精内保存。

多用于染溃变神经纤维而呈黑色，正常神经纤维呈黄褐色。

6）升汞、苦味酸、甲醛液

Mann液

热水100毫升，氯化汞2.5克，苦味酸1.0克

冷却后过滤。用时每100毫升加甲醛10~25毫升

极优良的常用固定液。固定后直接移入50%酒精。

7）甲醛、酒精、冰醋酸混合液

●Schaffer甲醛酒精冰醋酸混合液

甲醛10毫升，95%酒精 50毫升，加冰醋酸1~3%。

固定1~2天。

8）甲醛、酒精、苦味酸液

●Verhoeff液：

40%甲醛水溶液10毫升，95%酒精48毫升，蒸馏水36毫升，苦味酸1克

固定眼球48小时，即可脱水。

9）甲醛、升汞、冰醋酸液

●Stieve液

饱和升汞水溶液76毫升，40%甲醛水溶液20毫升，冰醋酸4毫升

渗透力强，固定稍大块组织效果较好。固定12~24小时，直接入70%酒精 脱水，最好脱汞处理。

●Romeis液

饱和升汞水溶液50毫升，5%三氯醋酸水溶液40毫升，甲醛水溶液（40%）10毫升（用时加）

固定12~24小时，小块组织1~2小时。固定入入90%酒精 脱水。

用于一般固定液或重固定液（适于Heidenhain铁苏木精染色）。

10）重铬酸钾、升汞、冰醋酸液

●Zenker液：

重铬酸钾2.5克，升汞5克，硫酸钠1克（可略），蒸馏水100毫升，加温溶解，冷却后过滤，存入 棕色瓶保存。可用1~2年。用时加冰醋酸5毫升。

细胞核和细胞质 染色较清晰，效果稳定。对肌组织和结缔组织染色也好。

2毫米厚的组织固定3~4小时，一般组织12~24小时。

固定后流水冲洗24小时。

11）重铬酸钾、升汞、甲醛液

●Helly液（Zenker-Formal液）

重铬酸钾2.5克，升汞5克，蒸馏水100毫升。用时加40%甲醛水溶液（中性或偏碱性）5毫升

对细胞质固定好，特别适于显示胰岛细胞颗粒、脑垂体腺细胞颗粒。

●Moximow液

重铬酸钾2.5克，升汞5克，蒸馏水100毫升，40%甲醛水溶液10毫升

12）苦味酸、甲醛、冰醋酸液

●Bouin液

饱和苦味酸水溶液75毫升，40%甲醛水溶液25毫升，用时加冰醋酸5毫升

对绝大多数器官组织固定很好，固定12~24小时，固定后用70%酒精~80%酒精 加少量饱和碳酸锂水溶液洗涤，除去组织块上的黄色。

13）冰醋酸、氯仿、无水酒精混合液

●Carnoy液

冰醋酸10毫升，氯仿30毫升，无水酒精60毫升

固定不宜过长。小块组织2~3小时，固定后直接入无水酒精 脱水。

常用于糖原和尼氏体固定。

14）重铬酸钾、铬酸、锇酸液

●Champy液

3%重铬酸钾水溶液7毫升，1%铬酸水溶液7毫升，2%锇酸水溶液4毫升

用前配。固定线粒体和类脂。

渗透力弱而不均匀，组织很小。固定后流水冲洗24小时。

15）铬酸、锇酸、冰醋酸液

●Flemming液

1%铬酸水溶液15毫升，2%锇酸水溶液4亳升，冰醋酸1毫升（用时加）

适于固定有丝分裂的细胞。

渗透力弱，易使组织硬化和变黑，对某些染色不利。

铁苏木精染色较好。

固定脂肪、髓鞘和线粒体最好。流水冲洗后脱水，石蜡包埋切片，能制作较好的髓鞘染色 标本。

组织块厚度不超过2毫米。

16）丙酮、冰醋酸、甲醛混合液

丙酮50毫升，冰醋酸2毫升，甲醛液4毫升，蒸馏水3毫升

固定7天，倒出原液一半，加等量丙酮固定5天，直接转入95%酒精脱水。

适于眼球固定。

17）升汞、三氯醋酸、甲醛、冰醋酸混合液

●Susa 液

升汞4.5克，氯化钠0.5 克，三氯醋酸2克，蒸馏水80毫升。棕色瓶避光保存（可用1~2年）。

用时加40%甲醛水溶液20毫升、冰醋酸4毫升。

一般组织固定1~24小时，直接入90%酒精 脱水。

渗透力强，对组织收缩小。保存糖原差。

适于内耳等难于固定的组织。

18）酒精、甲醛、冰醋酸、苦味酸液

●Bouin酒精溶液：

80%酒精 150毫升，甲醛水溶液60毫升，冰醋酸15毫升，结晶苦味酸1克。用前配制。

渗透力较强。固定1 天左右，直接转入95%酒精 脱水。

19）甲醛、重铬酸钾、冰醋酸、三氯醋酸混合液

●Kolmer液

5%重铬酸钾水溶液20毫升，105甲醛水溶液20诱惑，冰醋酸5亳升，5%三氯醋酸水溶液5毫升，10%醋酸钠水溶液5毫升

适于固定整个眼球及神经组织。固定24小时。