金黄色葡萄球菌基因组编辑技术原理
基于Red同源重组和CRISPR/Cas9的金黄色葡萄球菌基因组编辑服务。成熟的金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)编辑体系,助力您成功实现基因敲除、基因插入和点突变。
基于Red同源重组法的金黄色葡萄球菌基因组改造
金黄色葡萄球菌基因敲除的传统方法是利用自身的Red系统对外源进入的DNA进行同源重组,从而实现目标基因的等位替换。通过设计靶基因的同源融合片段,将其克隆至自杀载体中,自杀载体通过接合输入到靶细菌。通过抗生素筛选细菌基因组靶位点整合有自杀载体的插入突变株。在第二轮反向选择压力下,只有金黄色葡萄球菌基因组发生第二次同源重组并丢失自杀质粒才可以存活。
基于CRISPR/Cas9平台的金黄色葡萄球菌基因组改造
CRISPR/Cas9系统是细菌和古细菌特有的一种天然防御系统,用于抵抗病毒或外源性质粒的侵害。
研究内容
金黄色葡萄球菌基因敲除(Staphylococcus aureus gene knockout)
金黄色葡萄球菌基因敲入(Staphylococcus aureus gene knockin)
金黄色葡萄球菌基因点突变(Staphylococcus aureus gene point mutation)
参考文献:
Selle K, Barrangou R. Harnessing CRISPR–Cas systems for bacterial genome editing[J]. Trends in microbiology, 2015, 23(4): 225-232.
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