TLC薄层层析技术
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薄层色谱，或称薄层层析(thin-layer chromatography)，是以涂布于支持板上的支持物作为固定相，以合适的溶剂为流动相，对混合样品进行定性与定量分析、分离和鉴定的一种层析分离技术。20世纪50年代从经典柱色谱法及纸色谱法的基础上发展起来的一种平面色谱技术;至20世纪60年代后，人们对薄层色谱法在使用器材的规格、操作方法及术语使用的标准化等方面进行了大量的工作，使该方法日趋成熟和完善，广泛地应用于有机合成中。TLC薄层层析技术作为有机合成中，最直接的监测反应的手段，本文对其内容进行简单的介绍。
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薄层色谱（TLC）是一种非常有用的跟踪反应的手段，还可以用于柱色谱分离中合适溶剂的选择。薄层色谱常用的固定相有氧化铝或硅胶。流动相则是一种极性待选的溶剂。将溶液中的反应混合物点在薄板上，然后利用毛细作用使溶剂（或混合溶剂）沿板向上移动进行展开。根据混合物中组分的极性，不同化合物将会在薄板上移动不同的距离。极性强的化合物会“粘”在极性的硅胶上，在薄板上移动的距离比较短。而非极性的物质将会在流动的溶剂相中保留较长的时间从而在板上移动较大的距离。化合物移动的距离大小用Rf值来表达。这是一个位于0～1之间的数值，它的定义为：化合物距离基线（最先点样时已经确定）的距离除以溶剂的前锋距离基线的距离。
薄层色谱（TLC）实验步骤：
1) 切割薄板。通常，买来的硅胶板都是方形的玻璃板，必需用钻石头玻璃刀按照模板的形状进行切割。在切割玻璃之前，用尺子和铅笔在薄板的硅胶面上轻轻地标出基线的位置（注意不要损坏硅胶面）。借助锋利的玻璃切割刀和一把引导尺，你便可方便地进行玻璃切割。当整块玻璃被切割后，你就可以进一步将其分成若干独立的小块了。（开始的时候，也许你会感到有一些难度，但经过一些训练以后，你便会熟练地掌握该项技术。）
2) 选取合适的溶剂体系。化合物在薄板上移动距离的多少取决于所选取的溶剂不同。在戊烷和己烷等非极性溶剂中，大多数极性物质不会移动，但是非极性化合物会在薄板上移动一定距离。相反，极性溶剂通常会将非极性的化合物推到溶剂的前段而将极性化合物推离基线。一个好的溶剂体系应该使混合物中所有的化合物都离开基线，但并不使所有化合物都到达溶剂前端，Rf值最好在0.15~0.85之间。虽然这个条件不一定都能满足，但这应该作为薄层色谱分析的目标（在柱色谱中，合适的溶剂应该满足Rf在0.2~0.3之间）。那么，应该选取哪些溶剂呢？一些标准溶剂和他们的相对极性列于如下：
强极性溶剂：
甲醇〉乙醇〉异丙醇
中等极性溶剂：
乙腈〉乙酸乙酯〉氯仿〉二氯甲烷〉乙醚〉甲苯
非极性溶剂：
环己烷，石油醚，己烷，戊烷
常用混合溶剂：
乙酸乙酯/己烷：常用浓度0~30%。但有时较难在旋转蒸发仪上完全除去溶剂。
乙醚/戊烷体系：浓度为0~40%的比较常用。在旋转蒸发器上非常容易除去。
乙醇/己烷或戊烷：对强极性化合物5~30%比较合适。
二氯甲烷/己烷或戊烷：5~30%，当其他混合溶剂失败时可以考虑使用。
3) 将1~2mL选定的溶剂体系倒入展开池中，在展开池中放置一大块滤纸。
4) 将化合物在标记过的基线处进行点样。我们用的毛细管是买来的，此外，毛细管也可从加热过的Pasteur吸管上拔下。在跟踪反应进行时，一定要点上起始反应物、反应混合物以及两者的混合物。
5) 展开：让溶剂向上展开约90%的薄板长度。
6) 从展开池中取出薄板并且马上用铅笔标注出溶剂到达的前沿位置。根据这个计算Rf的数值。
7) 让薄板上的溶剂挥发掉。
8) 用非破坏性技术观察薄板。最好的非破坏性方法就是用紫外灯进行观察。将薄板放在紫外灯下，用铅笔标出所有有紫外活性的点。尽管在5.301中不用这种方法，但我们将采用另一常用的无损方法——用碘染色法。
9) 用破坏性方式观测薄板。当化合物没有紫外活性的时候，只能采用这种方法。在各种TLC显色剂的调配方法中，提供了很多非常有用的染色剂。使用染色剂时，将干燥的薄板用镊子夹起并放入染色剂中，确保从基线到溶剂前沿都被浸没。用纸巾擦干薄板的背面。将薄板放在加热板上观察斑点的变化。在斑点变得可见而且背景颜色未能遮盖住斑点之前，将薄板从加热板上取下。
10) 根据初始薄层色谱结果修改溶剂体系的选择。如果想让Rf变得更大一些，可使溶剂体系极性更强些；如果想让Rf变小，就应该使溶剂体系的极性减小些。如果在薄板上点样变成了条纹状而不是一个圆圈状，那么你的样品浓度可能太高了。稀释样品后再进行一次薄板层析，如果还是不能奏效，就应该考虑换一种溶剂体系。
11) 做好TLC标记，计算每个斑点的Rf值，并且在笔记本中画出图样。
常见拖尾原因及解决办法
1、首先考虑的是样品浓度过大，薄层板过载导致。这种情况直接降低样品浓度或者是上样量就可以验证了。
2、样品对硅胶的吸附能力过强导致的拖尾。对不同体系加入不同的调节剂，酸体系加冰醋酸或甲酸，碱体系加氨水、三乙胺或二乙胺。
3、展开剂的极性与样品极性不附，不能做到有效展开导致。可以通过调节展开剂极性解决。
4、如果是长带状，那最可能的原因是展开剂对样品的溶解度不够所导致。可以根据极性表换极性相近的对样品溶解度更好的溶剂做展开剂，另外样品未溶解完全，点在班上的样品有未溶固体样品也会导致长条状拖尾。
参考相关文章：TLC点板拖尾攻略
TLC显色剂汇总
注：TLC在浸润以下显色剂后，都一般需要热烤才能显色！
4-甲氧基苯甲醛显色 (适用于：所有有机化合物)
原料 ：
1. 4-甲氧基苯甲醛 (p-anisaldehyde) 13mL
2. 醋酸 (AcOH) 5mL
3. 浓硫酸 (conc. H2SO4) 18mL
4. 乙醇 (EtOH) 478mL
调配方法： 把1,2,4在冰浴条件下混合后，缓慢滴加3，冷藏保存。
磷钼酸显色剂 (适用于：所有有机化合物，特别是含有羟基的化合物)
原料：
1. 磷钼酸 (12MoO3.H3PO4) 5g
2. 乙醇 (EtOH) 100mL
调配方法： 把1,2混合成溶液
铈 – 钼酸铵显色 别名：HANESSIAN染色液(适用于：所有有机化合物)
原料：
1. 钼酸铵 ((NH4)6Mo7O24・4H2O) 25g
2. 硫酸铈 (Ce(SO4)2) 5g
3. 浓硫酸 (conc. H2SO4) 50mL
4. 蒸馏水 (H2O) 450mL
调配方法： 把1,2,3,4混合后即可使用
茚三酮显色 (适用于：胺基化合物)
原料：
1. 茚三酮 ((ninhydrin) 0.3g
2. 醋酸 (AcOH) 3mL
3. 正丁醇 (n-BuOH) 100mL
调配方法：把1,2,3混合成溶液即可。
小窍门：对于比较难显色的胺基化合物， 把TLC蘸一下HBr溶液加热烤一下后再蘸取茚三酮显色剂
二硝基苯肼显色 简称：DNP显色 (适用于：醛或酮类)
原料：
1. 2,4-二硝基苯肼 12g
2. 浓硫酸 (conc. H2SO4) 60mL
3. 蒸馏水 (H2O) 80mL
4. 乙醇 (EtOH) 200mL
调配方法： 把1,2,3,4混合成溶液即可。
碱性高锰酸钾显色 (适用于：所有有机化合物)
原料：
1. 高锰酸钾(KMnO4) 1.5g
2. 碳酸钾 (K2CO3) 10g
3. 氢氧化钠 (NaOH) 0.125g
4. 蒸馏水 (H2O) 200mL
调配方法： 把1,2,3,4混合成溶液即可。
注意要点： 试剂寿命比较短，一般三个月以内就得重新配置。
溴甲酚绿显色 简称：BCG显色 (适用于：羧酸类等含有酸性基团的化合物)
原料：
1. 溴甲酚绿(Bromocresol green) 40mg
2. 乙醇 (EtOH) 100mL
3. 0.1N 氢氧化钠水溶液 适量
调配方法：把1,2混合后，往里面滴加3直到溶液变成蓝色。
DRAGENDORFF试剂显色 (适用于：含氮化合物)
原料：
1. 次硝酸铋 (Bismuth subnitrate) 1.7g
2. 醋酸 (AcOH) 20mL
3. 蒸馏水 (H2O) 80mL
4. 碘化钾 (KI) 40g
5. 蒸馏水 (H2O) 100mL
调配方法：A液: 1+2+3， B液：4+5， A液(5mL)+B液(5mL)+醋酸(20mL)+蒸馏水(70mL) 混合配成
香草醛显色 (适用于：所有有机化合物)
原料：
1. 香草醛((Vanillin) 15g
2. 浓硫酸 (conc. H2SO4) 2.5mL
3. 乙醇 (EtOH) 250mL
调配方法：把1,2,3混合后配成，使用寿命较短。
碘/硅胶显色 (适用于：所有有机化合物)
原料：
1. 碘(I2) 适量
2. 硅胶(SiO2) 适量
调配方法： 把1,2混合在密闭容器中静置，显色的时候直接只需要把TLC放进去即可，碘熏后，用水冲一下，可以增强显色效果，并可以固定住显色一段时间。
紫外灯-UV LAMP (适用于：共轭结构化合物)
这个就不细说了。
5%的硫酸乙醇（广谱显色剂，尤其是含有羟基等易于氧化的基团）
原料：
1. 98%的浓硫酸 1 g
2. 乙醇 19 g
调配方法：将浓硫酸缓慢加入到乙醇中，加入少量无水硫酸镁干燥。
水 (适用于：最后的手段！)
在所有的显色剂都没用的情况下，把TLC稍微浸点水后，对着光看，有可能看到化合物的点(有机化合物不溶于水)
茜素 (适用于：硼酸/硼酸酯类化合物)
配制：0.1 M 的茜素丙酮溶液
显色的时候直接只需要把TLC放进去，在366nm紫外灯下观察有亮黄色荧光点。