细胞增殖与活性检测实验流程

细胞增殖是生物体的重要生命特征，细胞以分裂的方式进行增殖，通过分裂，可以将复制的遗传物质，平均地分配到两个子细胞中去，是生物体生长、发育、繁殖和遗传的基础。单细胞生物，以细胞分裂的方式产生新的个体。多细胞生物，以细胞分裂的方式产生新的细胞，用来补充体内衰老和死亡的细胞；同时，多细胞生物可以由一个受精卵，经过细胞的分裂和分化，最终发育成一个新的多细胞个体。

细胞增殖检测的准确方法之一，就是直接测定DNA的合成，同时也是测定物质毒性、评估药物安全、细胞健康的基本方法。通过检测细胞增殖活性，可以指示肿瘤细胞增殖活性、目的基因瞬转/稳转细胞系的细胞增殖活性，在小分子化合物/多肽等药物筛选及功能安全性研究、中药/中间体等药物筛选及功能安全性研究、目的基因过表达的基因功能研究、目的基因RNAi干扰的基因功能研究中发挥重要作用。

实验流程

CCK-8（Cell Counting kit-8）试剂中含有2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐（WST–8），其在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪硫酸二甲酯（1-Methoxy PMS）的作用下，被细胞线粒体中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色甲臜产物（Formazan）。因生成的甲臜物的数量与活细胞的数量成正比，因此可采用酶标仪在450nm波长处测定其光吸收值，从而间接反映活细胞数量。