细胞自噬检测实验流程
自噬(Autophagy),或称自体吞噬,是一个涉及到细胞自身结构通过溶酶体机制而被分解的过程,该过程是一个受到紧密调控的步骤,帮助细胞产物在合成、降解以及接下来的循环中保持一个平衡状态。“自噬”一词是由比利时化学家克里斯汀·德·迪夫在1963年创造的。90年代酵母的研究人员通过识别自噬相关基因,从而推动了自噬研究的开展。日本科学家大隅良典因对“细胞自噬机制的发现”,获得了2016年度的诺贝尔生理学或医学奖。在生物体内发育、分化、环境胁迫和肿瘤发生中具有重要的意义。
目前已有研究证明多种因素能够诱导细胞发生自噬,如饥饿、生长因子缺乏、微生物感染、细胞器损伤、蛋白质折叠错误或聚集、DNA损伤、放疗、化疗等。但是关于自噬信号的传递,现有的研究只明确了几种信号通路,包括抑制类和激活类,但具体的机制尚在研究中。
细胞接受自噬诱导信号后,在胞浆的某处形成一个扁平的类似“脂质体”样的膜结构,称为Phagophore。随着Phagophore不断延伸,将胞浆中的细胞器等成分,包裹住成为密闭的结构,称为“自噬体(autophagosome)”。自噬体形成后,可与溶酶体融合,自噬体中的内容物随即被降解,产物(氨基酸、脂肪酸等)被输送到胞浆中,供细胞重新利用,而残渣或被排出细胞外或滞留在胞浆中。
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