腺相关病毒包装收毒流程
病毒颗粒同时存在于包装细胞和培养上清中。可以将细胞和培养上清都收集下来以获得最好的收率。1) 准备一个干冰乙醇浴(将乙醇倾入装有干冰的泡沫盒即可,也可用液氮替代干 冰乙醇浴)和37°C 水浴;
2) 将产毒的细胞连同培养基一同收集到一个15ml 的离心管中。收集细胞时,将 培养盘倾斜一定角度将细胞刮到培养基中;
3) 1000 rpm/min,离心3 分钟,分离细胞和上清,将上清另外存放,细胞用1ml PBS 重悬;
4) 将细胞悬浮液在干冰乙醇浴和37°C 水浴中反复转移,冻融四次。每次融解后 稍加震荡。注意:每次凝固和解冻大概需要十分钟的时间。
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