基因敲除BEAS-2B细胞系

通过病毒转导、脂质体转染或核转移将gRNA和Cas9转移到细胞中，然后通过药物筛查后，产生单克隆，最终阳性克隆将通过测序进行验证。具体案例如下：

图2  BEAS-2B细胞系的敲除策略

P53基因是氡照射致BEAS-2B细胞恶性转化中的重要影响因素。在人正常肺上皮细胞（BEAS-2B）中敲除P53基因，并对基因敲除后的BEAS-2B细胞和正常BEAS-2B细胞分别进行氡染毒处理。研究人员发现，BEAS-2B细胞敲除P53基因后氡照射的BEAS-2B细胞更早地出现了恶性转化。相较于BEAS-2B细胞染氡组(2B-Rn)，P53基因敲除的BEAS-2B细胞染氡组(P53 KO-Rn)增殖速度更快（P<0.05），形成克隆的时间更早（P<0.05），侵袭力更强（P<0.05），上皮-间质转化（EMT）相关基因mRNA表达水平变化也更早（P<0.05）。结果表明，氡照射导致BEAS-2B细胞发生恶性转化，并且P53在氡气致肺癌中具有重要作用。