细胞凋亡的概念

细胞凋亡是多基因严格控制的过程，这些基因在种属之间非常保守，如Bcl-2家族、Caspase家族、抑癌基因P53等。凋亡过程的紊乱可能与许多疾病的发生有直接或间接的关系，如肿瘤和自身免疫性疾病等，因此如果你是研究肿瘤或退行性疾病，细胞凋亡的检测往往是必要的，因为这一指标将会成为后续机制研究的风向标。

由于细胞凋亡的过程有典型的形态和分子层面的变化，检测方法也是多样的，常用的有Annexin V/PI双染法、TUNEL检测法和Caspase-3活性检测法。其中，Annexin V/PI双染法因其可区分凋亡早期和晚期和方便量化而被广泛使用。磷脂酰丝氨酸(Phosphatidyl serine,PS)在细胞凋亡的早期，会从细胞膜内侧翻转到细胞膜的表面，暴露在细胞外环境中。Annexin-V能与PS高亲和力特异性结合，把绿色荧光分子FITC连接到Annexin-V即可标志内膜翻转的凋亡小体。而当细胞发生凋亡时，细胞膜通透性增强，PI可进入细胞结合DNA并发出荧光。因此通过流式分析Annexin-V-FITC和PI的信号分布便可区分凋亡早期（Annexin-V-FITC阳性+PI阴性）和晚期（Annexin-V-FITC阳性+PI阳性）的细胞（图3）。