面对乳糜血莫发愁,教你如何搞定

随着高脂血症患者的逐渐增加及脂肪乳成为肠外营养品的大量使用,使脂血标本呈上升趋势。众所周知,高脂血对血细胞分析仪、生化检验等都存在严重的干扰作用,如果不对其干扰进行纠正,可掩盖患者病情,危害其生命安全。
目前多数医院仍然采用血浆高速离心去脂、标本稀释和血浆置换等方法,虽然可以基本消除脂血对血常规参数(HGB、MCH、MCHC)的假性升高,但对PLT的处理效果不佳,往往还需要人工计数来纠正,反而增加工作负担。
此外,由于其操作程序繁琐,费时、费力、血浆等量置换过程人为因素和血浆体积量具有不可控性,容易吸附血小板层和白细胞层,无法进行标准化规范,结果可重复性差,效果不尽人意,并不适宜大范围、大标本量推广,限制了其在实际工作的广泛应用。如何快速、准确、简便、适用的处理血常规标本中脂血干扰尤为关键。

一位经验丰富的老师,发现脂血标本的问题后,经过不断摸索和创新,反复验证和比对,终于成功的创造出一套处理血常规标本严重脂血的快速处理方法,并且成功申请了国家专利,值得全国各地各级医疗单位的广泛推广。

其纠正方法为:将脂血标本上机检测,得到HGB校正前、HCT校正前等参数,再将其低速离心(离心力310-550g)2~3分钟,轻轻取出,吸出脂血浆;再将脂血浆进行全血细胞计数(CBC),检测出脂血浆中假的HGB浓度(HGB脂血血浆)。

计算公式:HGB校正值=HGB校正前-HGB脂血血浆(1-HCT校正前),MCH校正值=HGB校正值/RBC校正前;MCHC校正值=HGB校正值/HCT校正前。

通过上述方法对102份新鲜全血标本进行干扰纠正实验,其校正值与真实值的相关性均良好,校正值与真实值非常接近,达到预期效果。
不同浓度的甘油三酯(TG)对HGB浓度的干扰程度和不同HGB浓度受TG干扰程度的干扰试验发现:当血液中TG浓度≥4.02mmol/L时,加脂前后的HGB、MCH和MCHC等参数有显著差异(P值均<0.05),需要进行校正。HGB、MCH和MCHC受干扰的程度与TG的浓度成正比,TG浓度越高,干扰程度越大;HGB受干扰的程度与HGB自身浓度成反比,即HGB值越低,受干扰的程度越大。
贫血越严重的标本,越需要对高甘油三酯的干扰进行纠正,否则,血液中的高甘油三脂造成HGB假性增高,容易掩盖患者的病情,造成医疗事故。值得一提的是,贫血标本在被脂血干扰时,由于仪器没有报警提示和MCH及MCHC增高不明显,存在隐形干扰不易被发现。
当临床高度怀疑患者有出血倾向、或结果与历史数据差别较大,或检测结果与临床诊断不符者,可将标本低速离心或自然沉降15分钟,观察血浆是否存在浑浊来判断。实验还表明脂血对RBC、HCT和MCV等参数的干扰极小,可忽略不计;脂血对PLT和WBC的干扰,当PLT和WBC的值较低,而脂血较严重时,可引起二者假性增高,可以通过手工计数方法进行纠正。
有同行研究表明重度脂血经高速离心后在SysmexCA7000对PT、aPTT、Fig 、TT的检测结果与常规离心后在STAGO的检测结果一致,无统计学差义(P>0.05).证明高速离心对于凝血的项目还是可行,但是因为高速离心需要反复几次,需要的时间相对还是比较长的。也需要科室配置高速离心机才行。
也有作者用α-环糊精(α-CD)消除脂血对临床常见生化项目的影响。患者脂血的血清经α-CD处理后,其常用临床生化指标测定结果明显得到改善,其测定值更接近真实值。使用α-环糊精可以消除高脂血对大部分临床常用生化检测指标测定结果的影响。
对于凝血的项目,如果是脂血磁珠法原理检测对结果没有大的影响;如果是光学法原理,原则上是通知临床重新留取标本,如果有条件的话也可以对标本进行诸如稀释、高速离心及滤器处理等。
还有同行收集20例严重脂血标本, 分别检测3 000 r/m in离心10 m in后3倍稀释血浆和10 000 r /m in高速离心10 m in后原血浆的PT 和aPTT 两项指标, 对各回归方程进行验证。结果原血浆与3倍稀释后血浆的PT和aPTT两项指标检测值具有线性相关特征。20例严重脂血标本3倍稀释后的PT和aPTT两项指标检测值经过相应回归方程计算, 所得数据与高速离心后检测数据无显著统计学差异。表明稀释法可以作为临床实验室严重脂血标本的凝血检测。
也有同行用Lipoclear脂质清除剂消除脂血对常规生化项目检测干扰,结论显示Lipoclear脂质清除剂消除脂血的干扰效果较好,且操作简单、快速,对多数临床常规生化项目无明显干扰现象,值得在临床中推广应用。
综上所述,对于凝血标本个人认为可以先尝试稀释法检测,如果还是影响检测可以再使用高速离心法。对于生化项目个人建议直接使用高速离心法。也建议检验科常规配置高速离心机以及配套的EP管和吸管,以备突然遇到这些特殊标本的处理。
对于上面提到的脂质消除剂α-环糊精、Lipoclear、甚至听闻冰箱的氟利昂也可以,这些毕竟属于非常规试剂,也希望做的好的可以商业化,转为临床。

实例分析,三只脂血标本,分别为凝血、生化、免疫

吸取全部血浆加入1.5ml EP管中

放好样本,离心

高速离心机离心

离心后的效果,小心用加样枪吸取下面的血浆做测试

如果效果不好,吸出的血浆再次离心

吸出下面的血浆上机检测

总结归纳

血常规

影响:脂血对血常规的影响主要是可以导致Hb,MCH,MCHC等检测结果偏高,对白细胞检测也有一定影响。

处理方法:因为血常规所测的是细胞有形成分,而脂血中的乳糜微粒是存在于血浆中的,因此可以选择血浆置换法,用生理盐水置换掉血浆;或者用指血模式,可以减少影响。

凝血功能

影响:脂血对比浊法的的影响较大,对磁珠法的影响较小。

处理方法:首推高速离心法,一般可用12000-16000rpm,离心10min,吸取下层血清检测。如下层血清仍不理想,可以吸取下层血清转杯再次离心并延长离心时间,往往能够解决问题。

然后可以使用手工法,因为脂血只是干扰仪器对血浆凝固时间的判断,并不影响血浆凝固时间,因此可以采用手工法。

生化检验

影响:对单试剂,一点终点法试剂试剂形成偏高影响,如葡萄糖氧化酶法试剂,总胆固醇试剂,主波长在500-600尤为严重。对TBIL、DBIL形成负干扰,极容易出负值。对ALT、AST、GGT、ALP等项目形成干扰,主要在于反应曲线的上浮,仪器报吸光度错误,无法出值。对ASO、CRP等胶乳增强免疫比浊法试剂形成负干扰。

处理方法:对酶类项目可采用高速离心法;ISE离子选择电极法基本不受脂血影响,因此不用处理,可直接检测;免疫比浊法项目可用稀释法,用生理盐水对标本进行低倍数稀释,可一定程度减少脂血的影响。

临床检验医学综合整理,资料来源:检验频道、基层检验网、检验医学

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