Western Blot实验技术服务

蛋白质印迹法(Western Blot)通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或生物组织样品进行着色,通过分析着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中表达情况的分子生物学技术。

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳进行蛋白质样品的分离,随后将蛋白转移到硝酸纤维素薄膜上进行固定。固定的目的蛋白即为抗原,因此加入适量的对应抗体进行免疫反应,能与抗体紧密结合的抗原及为目的蛋白。而后加入有标记的二抗或酶,因此结合的抗原-抗体可被检测到。

大致流程如下:

1.        蛋白质的样品制备

2.        蛋白质定量

3.        蛋白质样品SDS-PAGE电泳

4.        转PVDF膜或硝化纤维膜

5.        免疫杂交反应

6.        化学发光(ECL),显影,定影

7.        凝胶图象分析

(0)

相关推荐

  • 生物科研实战

    western blot实验操作western blot原理简介:western blot技术主要是通过电泳技术区分不同的蛋白质组分,并将所分离的蛋白质转移至固体支持体上,通过特异试剂和抗体作为探针, ...

  • Western blot 实验技术及常见问题分析

    Western blot基本原理: 在电场的作用下将电泳分离的多肽从SDS-PAGE凝胶转移至一种固相支持体,然后用这种多肽的特异抗体来检测. Western blot应用: 目的蛋白的表达特性分析: ...

  • Northern Blot实验技术服务

    或称RNA印迹,是通过测定样品中的RNA以检测基因表达的分子生物学操作.通过检测细胞分化过程中或细胞在不同环境条件下特定基因的表达情况可观察到细胞调控或了解细胞功能等. Northern blotti ...

  • Southern blot(非放射性标记)实验技术服务

    Southern blot 是检测DNA样品中是否含有目的DNA片段的技术.将凝胶电泳分离得到的DNA片段转移到膜上,并采用探针杂交法检测目的DNA的存在.在遗传病诊断.DNA图谱分析及PCR产物分析 ...

  • 蛋白免疫印迹Western Blot(WB)技术服务

    蛋白免疫印迹(Western Blot)是将组织或细胞总蛋白质经电泳分离后转移到NC膜或PVDF膜上,然后利用特异性抗体检测某特定抗原的一种蛋白检测技术,已广泛应用于蛋白表达检测.抗体活性检测及疾病早 ...

  • 荧光免疫印迹(Western Blot)实验服务优势及实验流程

    一,实验原理 WB(Western blot),即免疫印迹(immunoblotting),是一项在分子生物学.生物化学.免疫学等领域中应用非常广泛的技术.这一技术利用抗体与组织或细胞样品中特定蛋白的 ...

  • 献给初学者:western blot 操作步骤详解

    献给初学者:western blot 操作步骤详解 2016-08-08 18:22 来源:生物学霸 作者:dlzhangyu 字体大小 - | + 我做 western 的时候,发现目前的资料都很老 ...

  • Image J和Graphpad如何对Western Blot条带灰度分析【干货】 | 每日生物评论

    摘要手把手教你利用Image J和Graphpad软件对Western Blot条带进行灰度分析和柱状图构建,看艾美捷干货分享.分享 微信 新浪微博 腾讯微博 QQ空间 电子邮件 有道笔记 手机 QQ ...

  • Western Blot实验常见问题罗列

    Western Blot实验常见问题罗列

  • Western Blot实验细节记方法

    Western Blot实验细节记方法