荧光蛋白用于多色实验

无论在融合表达还是非融合表达实验中，我们时常会面临需要选择多个FP进行共成像的实验需求，例如追踪多基因表达水平、亚细胞定位、研究蛋白互作和细胞筛选等（图8）。

图8. 荧光蛋白用于多色实验

选择FPs进行多色实验时除了考虑上述提到的基本八要素，还要兼顾荧光蛋白的兼容性。其中，选择兼容FPs遵守的原则是：选择不同荧光的峰值激发波长和峰值发射波长都应分开50-60 nm以上。

例如，CFP（ex 430 nm / em 474 nm）和YFP（ex 514 nm / em 527 nm）可以一起成像，但CFP和GFP（ex 488 nm / em 507 nm）在显示时会存在一些串扰。

目前一些比较常用的多色FPs组合：

双荧光（绿-红）：

• EGFP+mCherry,

• EGFP+tdTomato

• EGFP+mKate2

双荧光（青-黄）：

• CyPet+YPet

三荧光（蓝绿红/青黄红）：

• mTagBFP2+EGFP+mCherry

• mTagBFP2+EGFP+tdTomato

• mTagBFP2+EGFP+mKate2

• CyPet+YPet+mCherry

• CyPet+YPet+mKate2