基因敲除小鼠纯/杂合子鉴定方法
假设
条带a大小=引物F及引物Wt/He-R扩增的片段大小
条带b大小=野生型片段大小-敲除片段大小
同个line的杂合敲除小鼠互配的后代会有三种表型:野生型、纯合子、杂合子,需要鉴定纯杂合。由于敲除片段过大时,上文鉴定基因敲除阳性鼠设计的引物往往无法鉴定纯杂合,所以需要再设计一条引物在敲除片段上(靠近5’端或是3’端)。电泳结果若是只有条带b,则为纯合敲除小鼠;若是a,b两条条带都有,则为杂合敲除小鼠。
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假设
条带a大小=引物F及引物Wt/He-R扩增的片段大小
条带b大小=野生型片段大小-敲除片段大小
同个line的杂合敲除小鼠互配的后代会有三种表型:野生型、纯合子、杂合子,需要鉴定纯杂合。由于敲除片段过大时,上文鉴定基因敲除阳性鼠设计的引物往往无法鉴定纯杂合,所以需要再设计一条引物在敲除片段上(靠近5’端或是3’端)。电泳结果若是只有条带b,则为纯合敲除小鼠;若是a,b两条条带都有,则为杂合敲除小鼠。