【干货】基因敲除细胞系制备流程
1.细胞预实验(检测细胞转染效率、生长速度)。
2.gRNA靶点设计:在要敲除的基因上设计gRNA靶点。
3.检测gRNA靶点内源活性:我们将在基因敲除位点附近测试3-6对靶点来检测gRNA活性,若找不到合适的gRNA靶点,技术服务终止,客户支付到该步骤费用。
4.构建基因敲除细胞系, 筛选单细胞并培养获得细胞株。
5.基因型鉴定及RT-PCR检测。
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1.细胞预实验(检测细胞转染效率、生长速度)。
2.gRNA靶点设计:在要敲除的基因上设计gRNA靶点。
3.检测gRNA靶点内源活性:我们将在基因敲除位点附近测试3-6对靶点来检测gRNA活性,若找不到合适的gRNA靶点,技术服务终止,客户支付到该步骤费用。
4.构建基因敲除细胞系, 筛选单细胞并培养获得细胞株。
5.基因型鉴定及RT-PCR检测。