原位杂交(ISH)实验技术服务
原位杂交(ISH)是一种利用碱基互补配对,定向捕获细胞内靶核酸的一项检测显示技术。使用DNA或者RNA探针来检测与其互补的另一条链在细菌或其他真核细胞中的位置。在细胞或组织结构保持不变的条件下,用标记的已知的RNA核苷酸片段,按核酸杂交中碱基配对原则,与待测细胞或组织中相应的基因片段相结合(杂交),所形成的杂交体 (Hybrids)经显色反应后在光学显微镜或电子显微镜下观察其细胞内相应的mRNA、rRNA和tRNA分子。
技术原理:
技术流程:
1、样本接收:新鲜标本、固定组织、石蜡块、石蜡切片、冰冻切片、细胞爬片
2、 实验步骤:脱蜡至水、消化、预杂交、杂交、信号放大、显色、复染、封片
3、显微镜下观察结果、拍照分析
技术优势:
RNA原位杂交技术 经不断改进,其应用的领域已远超出DNA原位杂交技术。尤其在基因分析和诊断方面能作定性、定位和定量分析,已成为最有效的分子病理学技术,同时在分析低丰度和罕见的mRNA表达方面也有独到优势。
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