NK细胞外泌体的抗肿瘤作用
在癌症研究中，以前的研究多数是探索癌细胞释放的外泌体，但很少了解正常细胞释放的外泌体的功能。自然杀伤（NK）细胞对转移性或血液恶性肿瘤具有快速免疫作用，临床上已经在开发NK细胞的抗肿瘤特性。然而，NK细胞外泌体的特征和功能仍然是未知的。在这项研究中，来自韩国庆北国立大学医学院的Byeong-Cheol Ahn研究组探讨了NK细胞外泌体介导的抗黑色素瘤体外和体内的抗肿瘤作用[1]。
该研究发现，NK细胞外泌体对黑色素瘤细胞具有细胞毒性，但是对正常细胞无影响。通过FasL 抑制剂可减轻其对黑色素瘤细胞的细胞毒性。NK细胞外泌体在体外诱导了黑色素瘤细胞的凋亡。
接着，研究人员利用小鼠模型在体内检测了NK细胞外泌体的肿瘤抑制作用，发现NK细胞外泌体处理组的肿瘤大小显著小于对照组。
该研究的结果表明，NK细胞外泌体对黑素瘤细胞产生细胞毒作用，值得进一步将其发展为癌症的潜在免疫治疗策略。
若要将NK细胞外泌体开发应用，NK细胞外泌体的大规模生产是不可回避的一环。这里再给大家介绍一篇工作。是来自南加利福尼亚大学的研究人员在Journal of extracellular vesicles杂志上发表的一篇文章，介绍了活化的人NK细胞的胞外囊泡的大规模分离及其细胞毒性作用[2]。
目前缺乏获得功能性NK EV的大规模分离方法，这限制了其临床应用开发。该文献报道了一种简单、高效且成本低廉的分离大量NK EV的方法。离体培养和激活NK细胞，然后将其在无外泌体的培养基中孵育48小时，使用聚合物沉淀结合密度梯度离心的方法分离EV。分离的囊泡含有EV标志物tetraspanin CD63和相关蛋白（纤连蛋白），没有细胞质标志物细胞色素C。纳米粒子跟踪分析显示尺寸分布在100和200 nm之间，而透射电子显微镜成像显示椭圆形和相同尺寸的囊泡，满足EV的定义。重要的是，分离的EV成分对癌细胞具有细胞毒性。此外，该研究结果首次证明，分离的活化的NK（aNK）细胞EV含有从aNK细胞掺入的细胞毒蛋白穿孔素、颗粒溶素和粒酶A和B。在用NK EVs孵育的癌细胞中检测到胱天蛋白酶-3，-7和-9的活化，并且胱天蛋白酶抑制剂阻断了NK EV诱导的细胞毒性，表明aNK EVs激活靶细胞中的半胱天冬酶途径。大规模分离功能性aNK EVs的能力将促进其新的临床应用。
大规模分离活化NK细胞胞外膜泡的流程图及鉴定结果
参考文献：
1. Zhu, L., et al. (2017). "Exosomes Derived From Natural Killer Cells Exert Therapeutic Effect in Melanoma." Theranostics 7(10): 2732-2745.
2. Jong, A. Y., et al. (2017). "Large-scale isolation and cytotoxicity of extracellular vesicles derived from activated human natural killer cells." J Extracell Vesicles 6(1): 1294368.
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