Sci Rep：不同的分离方法影响外泌体的生物活性

大家都说或者经常听说不同方法分离出来的外泌体具有不同的作用，或者A方法得到的有X作用，但B方法得到的没有这种作用。但一直没有文献对此做过专门报道，下面我们来看看最新一篇Sci Rep比较了几种常见分离方法后得出了什么样的结论吧。

外泌体具有独特的生物学作用，且在疾病治疗上具有很好的应用前景，因此日益受到研究者们重视。然而，从体液中分离外泌体的方法仍有待改善，其详细的理化性质仍未得到彻底明确。来自意大利布雷西亚大学的研究者们利用最常用的四种分离方法从多发性骨髓瘤患者血清分离到外泌体，并利用Western blot，胶体纳米表面等离子体光子学，原子力显微镜（AFM）和扫描氦离子显微镜（HIM）等评估生物化学和生物物理技术制剂残留污染物的存在。用碘克沙醇和蔗糖梯度离心获得的外泌体是最纯的。相反，那些通过常规差速超速离心或一步法沉淀试剂盒获得的外泌体被残余基质污染严重。与纯净的外泌体相比，被污染的外泌体显示出较低的诱导内皮细胞的NF-κB入核能力，可能是因为这些杂质阻止了外泌体与细胞膜的相互作用和融合能力。这些结果表明，外泌体制备的纯度必须仔细评估，因为这会影响外泌体的生物活性。

碘克沙醇和蔗糖梯度离心获得的外泌体具有明显的促NF-κB入核作用

后记：看看，甭说一步试剂沉淀法了，就连我们常说的金方法差速超速离心法，与碘克沙醇和蔗糖密度梯度离心相比，就该paper探究的促进NF-κB入核的功能来说简直就是没有啊。所以，各位外泌体研究的同行们，当你没有找到你想要的表型时，想一想利用最好最纯的方法——碘克沙醇和蔗糖梯度离心是不是就可能发现你要的表型呢？

参考文献：Paolini, L., et al. (2016). "Residual matrix from different separation techniques impacts exosome biological activity." Sci Rep 6: 23550. IF=5.578