新的Cre小鼠品系怎么测试?
通常我们会利用Reporter小鼠与Cre小鼠杂交来验证Cre的表达谱。Reporter小鼠一般是在Rosa26位点插入带有lox-stop-lox终止盒以及报告基因(LSL-R)的一种工具小鼠,只有Cre酶介导重组切除终止盒后,才会有报告基因的表达。例如需要验证GeneX-Cre定点整合小鼠,可将Cre杂合子小鼠(GeneXCre/wt)与Reporter杂合子(Reporter lox/wt)或纯合子(Reporterlox/lox)小鼠交配,通过免疫组化、免疫荧光或原位杂交来判断Cre阳性的子代小鼠(GeneXCre/wt ; Reporter lox/wt)报告基因是否在已知表达GeneX的细胞中表达,从而了解Cre的特异性表达是否与预期的一致。
用Reporter小鼠验证Cre小鼠示意图。(图片来自Ref.6)
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