小鼠体外受精（IVF）实验操作流程

说过了IVF的优势，我们再简单和大家聊聊IVF的操作流程。

IVF操作具体分四步：

体外受精用培养皿准备

实验开始前一天在35 mm培养皿中加入2个200 μL TYH培养基液滴

精子的采集

(1) 将符合要求的性成熟（8周以上）的雄鼠颈椎脱臼处死，取出附睾上体尾部，去除脂肪与血迹后，置于一个TYH液滴内。

(2) 利用眼科剪在液滴内横断附睾尾，当精子充分游离出附睾尾后，将组织从液滴内取出，将培养皿置于培养箱。

图1. 雄鼠取精操作

卵母细胞的收集

处死超排后的雌鼠，取出两侧的输卵管，置入培养皿取出卵丘细胞团放入200 μL TYH培养基。

精卵混合

用10 μL移液器从精子滴吸取获能后的精子，加到卵子液滴中，根据卵团大小情况以及精子的活力每滴加8 μL左右的精子。将精卵混合后，把培养皿置于培养箱中培养。

体外受精完成后将胚胎移入假孕母鼠子宫，21天后小鼠就会出生了。

图2. 胚胎移植操作