文献阅读 | 次氯酸盐诱导的纤维蛋白原聚集是一种新的抗氧化作用在血浆中的基础
小燕子
Hypochlorite-induced aggregation of fibrinogen underlies a novel antioxidant role in blood plasma.
纤维蛋白原是血浆的主要成分，极易与生物氧化剂发生反应。有人提出，纤维蛋白原在抗氧化防御中发挥作用，但纤维蛋白原的氧化也被认为破坏正常的血液凝块，并与动脉粥样硬化的病理有关。在本研究中，我们发现生物氧化剂次氯酸盐能促进可溶性高分子量纤维蛋白原的形成，≥40 × 106da，当纤维蛋白原在体外受到加热或羟基介导的损伤诱导聚集时，这些聚集不会聚集。根据沉淀分析，次氯酸盐修饰的纤维蛋白原在37°C时是稳定的，与天然纤维蛋白原相比，它降低了铁诱导(羟基介导)沉淀的敏感性。与已知具有免疫刺激作用的次氯酸修饰白蛋白相比，次氯酸修饰的纤维蛋白原不会诱导RAW 264.7(巨噬细胞样)细胞或EOC 13.31(小胶质细胞样)细胞产生活性氧或诱导细胞死亡。此外，在人血浆中添加次氯酸盐后，纤维蛋白原的减少增加了血浆的免疫刺激特性。我们认为，次氯酸盐与血浆中的纤维蛋白原反应可能会减少其他次氯酸盐修饰的物种的积累，如免疫刺激性次氯酸盐修饰白蛋白。后者代表了纤维蛋白原在血浆抗氧化防御中的新作用。
蛋白质错折叠、氧化应激、抗氧剂、发炎、血、血浆蛋白。
Fig. 1：SDS-PAGE凝胶图像显示NaOCl对纯化的人纤维蛋白原的影响，Western blot分析NaOCl处理的人血浆中的纤维蛋白原。
Fig. 2：原生PAGE凝胶图像显示NaOCl对纤维蛋白原、α2M、白蛋白和CPK迁移的影响。
Fig. 3：NaOCl处理纤维蛋白原的尺寸排斥色谱、双反式分析和圆二色谱分析。
Fig. 4：浊度测定显示NaOCl对热致纤维蛋白原沉淀的影响。
Fig. 5：天然凝胶浊度测定及图像显示NaOCl诱导的改性对Fe的影响3Cl诱导纤维蛋白原沉淀。
Fig. 6：流式细胞仪分析表明，NaOCl对白蛋白、纤维蛋白原、人血浆或Fd所致细胞ROS产生的影响。
Fig. 7：流式细胞仪分析显示NaOCl对纤维蛋白原与264.7细胞表面结合的影响。
考虑到炎症反应中纤维蛋白原水平的升高是一种进化上保守的反应，合理的说法是，纤维蛋白原是在氧化应激的存在下发挥作用的。尽管如此，有关纤维蛋白原氧化是否有益或有害的争论仍在现场进行，有证据表明有促进血栓形成和抗血栓形成的作用。这项具有里程碑意义的研究为阐明次氯酸盐修饰的纤维蛋白原的生物学重要性提供了重要的一步。与纤维蛋白原作为一种抗氧化剂的重要作用一致，我们的研究结果支持了以下结论：纤维蛋白原对次氯酸盐诱导的聚集具有独特的敏感性，在正常生理相关温度下不促进其沉积，或赋予刺激免疫细胞活性氧生成的能力。然而，有道理的是，次氯酸盐修饰的纤维蛋白原有重要的细胞后果，目前还不清楚。总之，他的研究结果强调，为了了解纤维蛋白原在健康和疾病中的不同生物学作用，必须考虑个别生物氧化剂的具体作用。