【实用分享】 微生物检验的注意事项你都知道吗
一、培养基的配制及使用
(1)每次配制时,要注意其试剂是否在保质期内,查看其开瓶日期及瓶口密封性,保证其未变质,并且未吸潮。
(2)培养基配制时,称量要准确,包括盐水的分装要准确。
(3)一定要保证现配制现灭菌,未灭菌的配好培养基不能长时间放置,更不可隔夜。
(4)灭菌时要保证恒温、恒压,同时要保证有效灭菌时间。
(5)灭菌过的培养基要冰箱保存,可保存一周,一般不超过 3 天。而且要遵循“先入先出”原则,先配制的要先使用。
(6)在使用时,要根据当班次的使用量,用水浴锅先将培养基溶化为液态,然后及时调低水域温度(先化好的可从水域取出,放在水浴锅锅盖上)待用,千万不可长时间使培养基处于高温状态。做产品微生物检测时,倾倒培养基温度在 45℃左右,不可过烫,避免将菌烫死;也不可过凉,化好的培养基又结块凝固,不便于观察结果。
(7)尽量集中做样,避免频繁打开同一瓶培养基瓶塞,增大培养基的污染几率,出现误差结果。
(8)培养基剩余过少时,可先将其倾倒成空白用板。
二、检测环境的维持
(1)大环境(房间)
做样时,窗户和空调要关闭,或用酒精对房间进行喷雾消毒,避免房间内空气流通影响安全柜内部环境(最好在有通排风系统的恒温恒湿无菌间进行操作);
如果在原来的原料微生物检测室进行检测,要定期开启紫外灯,对房间进行杀菌。
(2)小环境(生物安全柜)
01、工作前的准备
a.首先紫外灯照射30分钟
b.关紫外灯,打开安全柜的日光灯和风机,用消毒剂对生物安全柜的内表面进行消毒擦拭
c.将实验中需要用到的物品集中用消毒剂擦拭后放在台面相应位置上(切记勿阻挡风口!)
d.等待5min,净化工作区的空气污染物。
02、操作规范
a.双臂垂直缓慢进入前面的开口,在生物安全柜中等待大约一分钟,以使安全柜调整完毕后才可对物品进行处理。
b.所有操作应在离前窗10cm以外的工作区进行。
c.废弃物应丢弃在生物安全柜内的处理容器中。
03、操作时注意事项
a.避免胳膊在前开口处快速移动和频繁进出。
b.尽量避免污染的物品进入洁净区。
c.避免使用明火干扰气流,可使用微型电加热器,最好使用一次性接种环。
d.在生物安全柜内进行操作时,不能进行文字工作,
e.尽量减少操作者身后的人员活动。
04、工作结束后的要求
a.将柜内物品移出前,应使用有效的消毒剂擦拭(特别是霉菌)
c.等待5分钟后,关闭前窗,关灯,关风机,紫外灯照射30分钟。
1)玻璃器皿:用干热灭菌方式进行灭菌,保证恒温、时间足够(但不可时间过长,导致玻璃器皿易裂纹而报废),若用湿热灭菌,湿热灭菌后需要彻底烘干。
11)做样完毕,及时放入相应培养箱进行培养,并清理清洁安全柜。
五、微生物的培养
(1)在培养过程中,要定期监控培养箱温度,保证其在适宜的温度进行培养。
(2)要按照要求及时观察结果,出现异常,要及时分析原因进行反馈。
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