三羟甲基氨基甲烷缓冲液的优缺点配置方法以及应用

Tris中文品名为三羟甲基氨基甲烷； 氨基丁三醇；缓血酸胺；2-氨基-2-（羟甲基）-1,3-丙二醇。是一种白色结晶或粉末。溶于乙醇和水，微溶于乙酸乙酯、苯，对铜、铝有腐蚀作用，有刺激性的化学物质。

Tris有很高的缓冲能力，在水中溶解度高，对很多酶反应是惰性的，使Tris成为用于许多生化目的非常满意的缓冲液。一般用于稳定反应体系的pH，在pH7.5-9.0之间有较强的缓冲能力。

Tris缓冲液的优点：

① 因为Tris碱的碱性较强，所以可以只用这一种缓冲体系配制pH范围由酸性到碱性的大范围pH值的缓冲液；

② 对生物化学过程干扰很小，不与钙、镁离子及重金属离子发生沉淀。

Tris缓冲液的缺点：

① 缓冲液的pH值受溶液浓度影响较大，缓冲液稀释十倍，pH值的变化大于0.1；

② 温度效应大，温度变化对缓冲液pH值的影响很大，△pKa／℃＝－0.031，例如：4℃时缓冲液的pH＝8.4，则37℃时的pH＝7.4，所以一定要在使用温度下进行配制，室温下配制的Tris-HCl缓冲液不能用于0℃～4℃；

③ 易吸收空气中的CO2，所以配制的缓冲液要盖严密封；

④ 此缓冲液对某些pH电极发生一定的干扰作用，所以要使用与Tris溶液具有兼容性的电极。

Tris缓冲液配置方法：

配制Tris-HCl缓冲液的方法有两种：分别配制0.05 mol/L Tris和0.05 mol/L HCl溶液，然后按常用表中所列体积混合即可。但是由于标准浓度的稀盐酸不易配制，所以常用另一种方法：以配置1 L 0.1 mol/L的Tris-HCl缓冲液为例：先称12.11 g Tris碱溶于950 mL～970 mL 去离子水中，边搅拌边滴加4 N HCl，用pH计测定溶液pH值至所需的pH值，然后再加水补足到1 L。

Tris缓冲液pH范围：

Tris缓冲液在生物化学研究中使用较广泛的一种缓冲剂，它的常用有效pH范围是在“中性”范围，如：

Tris-HCl缓冲液：pH＝7.5～8.5

Tris-磷酸盐缓冲液：pH＝5.0～9.0

Tris缓冲溶液的应用：

在电泳缓冲液中同甘氨酸构成缓冲体系稳定pH值；在凝胶中使用Tris-HCl缓冲体系稳定pH值；被广泛用作核酸和蛋白质的溶剂；Tris缓冲液的低离子强度特点还可用于线虫的中间纤维的形成；在Tris盐酸缓冲液中加入EDTA制成“TE缓冲液”，可用于DNA的稳定和存储；将调节pH值的酸溶液换成乙酸，获得“TAE缓冲液”，换成硼酸可获得TBE缓冲液。这两种缓冲液常用于核酸电泳实验中。