商业无菌镜检 请教野兽老师

很久不上帖子，今天上来，回个帖子帮助一下新人。嘿嘿。首先是染色问题，染色是用能着色的染料（有些附着在细胞壁，有些附着在细胞膜上，还有些其他）让细菌身体带有颜色，然后通过显微镜后让我们容易看到细菌的样子（如果不染色，细菌大多会因为透明而看不清楚或看不到），一般染色后细菌因为经过染料，过火固定等步骤已经不幸都死掉了，所以我们大多看到的染色后的菌都是死掉的，如果想看活的需要用好一点的显微镜（具体是暗视野还是其他什么的忘记了 自己去咨询一下显微镜公司或百度一下不难找到的），如果要区分样品中的菌的死活有2种染色办法，当然染完之后你看到的载玻片上的菌还是死的。下面介绍2种区分死菌活菌的染色办法，前提你要有荧光显微镜 不然染色完了也没法看。评分吖啶橙染色，（前面有同学提到），细菌在吖啶橙染色后 蓝光激发下呈现红色（活菌）或绿色（休眠或死菌），具体染色办法可以百度或查找文献，值得注意的是染色要避光，一般在冰箱用进行。还有一种区分自养菌异养菌的染色办法，DAPI染色（4'6-二脒基-2-苯基吲哚），染色后异氧菌紫外光下呈蓝色，自养型菌呈现红色。再次就是说一下显微镜的倍数问题，一般目镜用10倍的，物镜分为4,10,20,40,100倍镜头，其中高低的区分是根据倍率高低而定的，所谓低倍就是4,10,20这种倍数比较低的，高倍就是40,100这种高倍的而已，如果要计数你需要了解镜头的倍数（物镜和目镜相乘），然后选取合适的镜头以便看的清楚明白的大小合适为宜。最后说一下视野，所谓视野就是你在当前目镜和物镜组成的镜头下看到的圆圈圈那个框下的所有能看到的位置，所以计算一个视野内细菌数就是你看到一个圈圈内的细菌总数，然后你再换一个视野，就是另一个圈圈内菌数咯，如果要计算5个视野内，就是找5个比较均匀一致的视野来观察就行。