新冠抗体假阳性，无外乎这8种原因！
作者：李雪 李琦
单位：中国中医科学院西苑医院检验科
患者，男，76岁，1月21日脑病科就诊，临床诊断急性脑血管病， 患者于1月19日和20日新冠核酸检测结果均为阴性，21日进行新冠抗体检测（仪器A，直接化学发光法）时，发现结果显示IgM抗体为1.864 S/CO(参考区间<1.0 S/CO)，结果上报给科主任的同时，采用仪器B（磁微粒化学发光法）和胶体金的方法对标本进行复查，复查结果显示：仪器B均为阴性（图2），胶体金为IgG疑似阳性（图3）。
那么，该患者为什么会出现2019-nCoV特异性IgM和IgG抗体结果不一致的情况呢？
国家卫健委颁布的《新型冠状病毒肺炎诊疗方案（试行第八版）》中明确表示：目前新冠抗体主要采用免疫学方法检测，因此多种因素会造成对实验的干扰，抗体检测可能会出现假阳性。一般不单独以血清学检测作为诊断依据，需结合流行病学史、临床表现和基础疾病等情况进行综合判断。
1、内源性
内源性干扰物质一般包括类风湿因子、嗜异性抗体、补体、因使用鼠抗体治疗或诊断诱导的抗鼠Ig抗体等。在日常的临床血清（浆）标本中，有相当比例的标本不同程度的含有上述各种干扰物质，从而可能导致测定结果的假阳性。
（1）类风湿因子RF
在类风湿患者、其他疾病以及正常人血清中，常含有较高或不同浓度的RF，其通常为IgM型，亦有IgG和IgA型。RF具有与变性IgG产生非特异结合的特点，因此在免疫测定中，其可与固相上包被的特异抗体IgG以及随后加入的标记的特异抗体IgG结合，从而出现假阳性结果。尤其是在捕获法IgM型特异抗体的测定中表现最为明显，因为此时固相包被的抗体为抗人µ链抗体，IgM型RF的存在可使其大量结合于固相。
（2）嗜异性抗体
人类血清中可能会含有抗啮齿类动物（如鼠、马、羊等）的抗体，即天然嗜异性抗体。有研究表明，天然的嗜异性抗体（IgG）可分为两类，一类（85%的假阳性由其引起）可结合于山羊、小鼠、大鼠、马和牛IgG的Fab区域，但不与兔IgG的Fab区结合。另一类（15%的假阳性由其引起）可结合于小鼠、马、牛和兔IgG的FC区表位，但不与山羊和大鼠IgG的FC区表位结合。嗜异性抗体可通过交联固相和标记的单抗或多抗而出现假阳性反应。
（3）补体
在固相免疫测定中，来自哺乳动物的固相特异抗体和标记二抗均可以激活人补体系统。因为其在固相吸附及结合过程中，抗体分子发生变构，Fc段的补体C1q结合位点被暴露出来，这样C1q就成为一个中介物将二者交联起来，从而出现假阳性结果。
（4）因使用鼠抗体治疗或诊断诱导的抗鼠Ig抗体
在临床上，有可能使用鼠源性单克隆抗体进行靶向治疗，及使用放射性核素标记鼠源性单克隆抗体进行影像诊断等，均有可能使相应患者体内产生抗鼠抗体。这种抗鼠抗体对使用鼠源性单克隆抗体的免疫测定，可产生假阳性结果。
（5）溶菌酶
溶菌酶可与等电点较低的蛋白有强的结合能力。免疫球蛋白等电点约为5，因此在免疫测定中，溶菌酶可在包被的IgG和标记的IgG间形成桥接，从而导致假阳性。
2、外源性
外源性干扰物质包括标本溶血、标本被细菌污染、标本贮存时间过长和标本凝固不全等。
（1）标本溶血
要注意避免出现严重溶血。血红蛋白的血红素基团有类似过氧化物的活性，因此在以辣根过氧化物酶（HRP）为标记酶的酶联免疫吸附测定（ELISA）和化学发光免疫分析法（CLIA）中，如血清标本中血红蛋白浓度较高，则其在温育过程中会吸附于固相，从而与后面加入的HRP底物反应显色或发光，导致假阳性。
（2）标本贮存时间过长
标本在2-8℃下保存时间过长，IgG可聚合成多聚体，在间接法免疫测定中会导致本底过深，甚至造成假阳性。
（3）标本凝固不全
血液采集后，如收集管中无促凝剂和抗凝剂，则血液通常在半小时后开始凝固，18-24h完全凝固。日常检验中，有可能在血液还未开始凝固时即离心分离血清，此时因血液没有完全凝固，离出的“血清”并非为完全的血清，其中仍残留部分纤维蛋白原。如将其加入微孔中，在ELISA测定过程中仍可以形成肉眼可见的纤维蛋白块，易造成假阳性结果。
抗体检测试剂说明书预期用途中明确说明：抗体检测试剂仅用作对新冠病毒核酸检测阴性疑似病例的补充检测，或在疑似病例诊断中与核酸检测协同使用，不作为新冠病毒感染者确诊和排除的依据，也不适用于一般人群的筛查。
通过该病例我们意识到，遇到新冠抗体阳性时，应关注患者新冠核酸检测结果、临床症状体征及其流行病学史，使用其他检测方法进行复查，排除可能干扰抗体检测的影响因素，并及时与临床沟通，必要时可以通过动态监测新冠核酸、IgM和IgG抗体水平来判断有无感染的发生，确保报告的准确与及时，为新冠的临床诊治提供支持。
来源：检验科