KO first与conditional KO小鼠模型的区别

传统的conditional KO的做法是在需要敲除的片段（我们称为Critical region，下同）两侧各放置一个loxp site，为了便于筛选，我们在其中一个loxp site旁边同时带上Neomycin标记，此标记两侧带有FRT位点（即FRT-Neo-FRT-loxp）。这样的小鼠我们称为flox小鼠，将 flox小鼠与Flpe （识别FRT位点的重组酶）品系交配可以删除Neo标记，得到不带Neo标记的flox小鼠。flox小鼠与Cre表达品系交配可以删除两个loxp位点 之间的部分，包括Critical region及Neomycin标记。Cre品系是各种组织、细胞特异表达Cre重组酶的转基因或基因敲入小鼠，将flox小鼠与它们交配就实现了组织、 细胞特异的敲除，即Conditional敲除。

KO first与conditional KO最大的不同在于，我们在上述neymycin标记的位置的元件更为复杂，是一个带有剪接受体位点的LacZ和Neomycin的合并体。这 样，neomycin作为筛选标记，功能与上述conditional KO中一致，LacZ就能够作为reporter在目的基因的promoter启动下，与目的基因一同表达，可以方便地对目的基因的表达进行定位。同样， 与Flpe表达品系交配可以删除lacZ-neo标记，转变成常规的conditional KO的flox小鼠。

在与Flpe品系交配之前，KO first模型的flox小鼠与conditional KO模型的flox小鼠不同，conditonal KO中的flox小鼠表型正常，但KO first却是KO （knockout)表型。与Flpe品系交配之后，两种策略的flox小鼠相同，都表现正常。

一般来说，conditional KO带有neomycin的小鼠可以直接用cre品系交配获得条件型敲除的鼠，但是，KO first必须先与Flpe品系交配后再与Cre品系交配，因此，在时间上会多一代时间。