腺病毒构建原理

◆腺病毒（ADV）是一种无包膜的线性双链DNA病毒，其空间结构为立体对称的20面体，衣壳由252个壳粒组成，直径在100nm左右。现已知有51种腺病毒，根据组织嗜性不同被分成ABCDEF六个不同亚群，其中C亚群的第2和第5血清型为最常见的腺病毒载体。

◆ADV的包装过程依赖于HEK-293细胞系。ADV对宿主细胞的侵染过程则是通过受体介导的内吞作用进入细胞内，基因组并不整合到宿主细胞基因组中，而是以游离状态在细胞核内表达，因而基于腺病毒载体的基因递送具有瞬时表达的特点。

◆腺病毒具有广泛的细胞和组织感染能力，且其携带基因片段的容量大（能达到7kb左右的容量）。体外应用时，腺病毒载体转基因效率高（接近100%的转导效率），且可转导不同类型的细胞，对于大量难转染细胞的基因递送是一个很好的工具。在体内应用时，腺病毒具有嗜肝的特点，可经尾静脉注射感染肝脏，但由于腺病毒免疫原性强，感染剧烈，故常会引起动物局部组织炎症反应和机体免疫反应，对动物体征和实验结果的客观性造成影响，因此，在利用腺病毒进行体内研究时，要考虑其使用剂量。

◆腺病毒可在短时间内快速表达，一般1-3天即可达到高峰（tips：对于快速表达，亦可以选择双链腺相关病毒—scAAV，具有高效、快速、低免疫原性的特点）。另外，由于其基因容量大，这使得腺病毒在大基因片段的表达中作用重要。