缓冲液MOPS在电泳实验中的作用及配置方法

在电泳实验中,会用到缓冲剂来维持电泳稳定系统恒定PH值的必要条件,因为在电泳实验时它的正极与负极会发生电解反应,正极会发生氧化反应,负极会发生还原反应。长时间的电泳会使正极变酸,负极变碱。而缓冲液能使溶液两极的pH保持基本不变。还会使溶液具有一定的导电性,有利于DNA分子的迁移。

说到这里很多人都想到了生物缓冲液MOPS (3-吗啉丙磺酸),它属于Good’s缓冲剂,在水中有良好的溶解性,缓冲范围在6.5-7.9之间,可作为二维凝胶电泳中等电聚焦电泳(IEF)的电解质系统成分;还可应用于Northern杂交,作为RNA的分离和转膜时的缓冲液。

电泳缓冲中 常用的10×MOPS Buffer配制方法如下:

(1)称量41.8 g MOPS,溶解于约700mL DEPC处理水中;

(2)使用2 N NaOH 调节pH值至7.0;

(3)向溶液中加入DEPC处理的1M NaOAC 20mL、0.5M EDTA(pH8.0) 20mL;

(4)定容至1 L,用0.45 μm 滤膜过滤除去杂质,室温避光保存。

除了MOPS缓冲液之外用于电泳中的生物缓冲剂还有许多,它们之间也有一定的区别,适用于各种电泳中。而在现在的市场上,生物缓冲剂的商家众多,产品规格与质量参差不齐。

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