苏木素伊红(HE)染色试剂盒的介绍
染色原理介绍:
1.苏木素伊红染色后细胞核呈现蓝色,细胞浆呈现粉红色或红色。
2.本试剂盒可以和免疫荧光染色配合使用。苏木素伊红染色试剂盒,染色后可以进行免疫荧光染色或其它染料的染色。
染色液可以重复使用,直至认为效果不佳时再换用新的染色液。本试剂盒至少可以染色200个样品。
试剂盒组成:
苏木素染色液;伊红染色液
使用说明介绍:
1.样品处理
a)对于石蜡切片:
二甲苯中脱蜡5-10分钟。
换用新鲜的二甲苯,再脱蜡5-10分钟。无水乙醇5分钟;90%乙醇2分钟。70%乙醇2分钟;蒸馏水2分钟。
b)对于冰冻切片:蒸馏水2分钟。c)对于培养细胞:
用4%多聚甲醛固定10分钟以上。蒸馏水洗涤2分钟。换用新鲜的蒸馏水,再洗涤2分钟。
2.苏木紊伊红(HE)染色
对于上述处理好的样品:
苏木素染色液染色5-10分钟(可以根据染色结果和要求调整时间).浸自来水中冲洗去多余的染色液,约10分钟。蒸馏水再洗涤一遍(数秒钟)。95%乙醇5秒。伊红染色液染色30秒-2分钟(可以根据染色结果和要求调整时间)。此时,如果需要直接观察,可以用70%乙醇洗涤2次。如需脱水、透明后封片按后续步骤进行,70%乙醇洗涤后仍可按照后续步骤进行脱水、透明和封片处理。
3.脱水、透明、封片或进行其它染色
a)脱水、透明、封片:
95%乙醇脱水2分钟。换用新鲜的95%乙醇再脱水2分钟。二甲苯透明5分钟。换用新鲜的二甲苯,再透明5分钟。用中性树胶或其它封片剂封片。显微镜下观察,细胞核呈蓝色,而细胞浆呈粉红色或红色。
b)进行其它染色:
如果进行免疫荧光染色,或进行Hoechst等荧光染料的染色,在伊红染色液染色后:70%乙醇洗涤⒉次,每次⒉分钟。PBS或生理盐水或TBS或TBST 等用于免疫染色或荧光染料染色的溶液浸泡5分钟。然后就可以进行免疫荧光染色或其它荧光染料的染色了。
注意事项:
1.需自备4%多聚甲醛、70%乙醇和95%乙醇。如果需要脱水、透明和封片处理,还需自
备二甲苯,中性树胶或其它封片剂。
2.如果样品是石蜡切片,需自备90%乙醇,无水乙醇以及二甲苯。染色液可以重复使用
多次,认为效果不佳时再更换新的染色液。
3.第一次使用本试
剂盒时建议先取1-2个样品做预实验。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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zzj 2021.3.26