小鼠尾基因组DNA提取步骤

（1）剪取小鼠尾端约0.5厘米（视鼠龄及鼠尾粗细可调整, 尽量使鼠尾体积相互接近），将鼠尾放入已编号1.5ml离心管中并盖好盖子。

（2）每管加0.5ml裂解液和50µl蛋白酶K贮存液并将盖盖紧。

（3）将离心管置于杂交管中并用纸团稍加固定。

（4）将离心管置杂交炉中，56℃转动过夜。

（5）次日将样本于室温，12000rpm离心 10分钟。

（6）上清倒入1.5ml 离心管中，加1ml 无水乙醇（约2倍上清体积），盖紧盖子后轻摇，可见絮状沉淀。13000rpm, 15min,弃上清。

（7）加70%乙醇1ml，洗涤，13000rpm离心10~15min，弃上清，收集沉淀，室温晾10~15min。

（8）每管加80~100µl 灭菌水，盖好后置室温或37℃ 1小时充分溶解。在室温中放置数小时，待DNA全部溶解后-20℃保存，或直接进行PCR或杂交等实验。如DNA溶解不完全,在37℃水浴中放置30~60min，但不可过夜。DNA样品的OD260/280在1.8-2.0之间。

• 注意：

裂解鼠尾一定要充分，有条件尽量使用杂交炉。因为如果裂解过程中组织与裂解液始终保持静止，而没有翻转的过程，这会导致DNA和鼠毛之类的杂质没有完全分开。离心去除杂质的过程中，DNA就会随着这些杂质一起被抛弃了。