免疫共沉淀实验目的及原理

研究蛋白之间相互作用必不可少的实验是免疫共沉淀(CoIP),常被用于鉴定特定蛋白复合物的中未知蛋白组分,因其具有可信度高的优点,在现在基础医学研究中广泛应用,本文将为您详解CoIP的实验原理和操作步骤,实验刚入门的同学必看哦。

  一、实验目的

  1)检测两种目标蛋白是否在体内相互作用;

  2)找到与目标蛋白在体内存在相互作用的新蛋白。

  运用这项技术,说不定你会有新的发现哦!

  二、实验原理

  CoIP是利用抗原蛋白和抗体的特异性结合、以及“Protein A/G"特异性地结合抗体(免疫球蛋白)FC段的现象开发出来的方法。

  目前多用Protein A/G预先结合在Argarose Beads上,使之与含有抗原蛋白的溶液(如细胞裂解液)及抗体(诱饵蛋白X抗体)反应后,Beads上的Prorein A/G就能通过抗体吸附诱饵蛋白X,诱饵蛋白X通过与靶蛋白Y相互作用将其从细胞裂解液中分离出来,从而达到免疫共沉淀的目的。

  如果还是不懂,看图就知道啦!

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